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利用指数流加补料高密度发酵产β-呋喃果糖苷酶重组大肠杆菌
引用本文:吴彬,裴智鹏,成骋,吴斌,何冰芳.利用指数流加补料高密度发酵产β-呋喃果糖苷酶重组大肠杆菌[J].微生物学通报,2017,44(4):766-773.
作者姓名:吴彬  裴智鹏  成骋  吴斌  何冰芳
作者单位:1. 南京工业大学生物与制药工程学院 江苏 南京 211816,1. 南京工业大学生物与制药工程学院 江苏 南京 211816,1. 南京工业大学生物与制药工程学院 江苏 南京 211816,1. 南京工业大学生物与制药工程学院 江苏 南京 211816,2. 南京工业大学药学院 江苏 南京 211816
基金项目:高等学校博士学科点专项基金-优先发展领域项目(No. 20123221130001);国家自然科学基金项目(No. 21506099);江苏省高校自然科学研究面上项目(No. 15KJB530008)
摘    要:【目的】对重组大肠杆菌BL21(DE3)/pET22b-β-ffase进行高密度发酵产β-呋喃果糖苷酶工艺研究。【方法】比较溶氧反馈补料和指数流加补料对重组菌发酵产酶的影响,对不同比生长速率和诱导时机进行优化。【结果】确定了双阶段指数流加过程中重组菌生长的比生长速率,分别控制诱导前期比生长速率为0.20 h~(-1),诱导后期比生长速率为0.13 h~(-1),诱导时机为指数中期。获得细胞干重约为51 g/L,最高酶活达到1.79×10~5 U/L,单位菌体产酶量为3 510 U/g,单位产酶速率达到3.58×10~4 U/(L·h),生物量、单位菌体产酶量和产酶速率分别是指数流加未优化前的1.8、1.7和3.0倍。【结论】双阶段指数流加补料工艺能有效提高β-呋喃果糖苷酶的产酶量,为β-呋喃果糖苷酶的进一步工业化奠定基础。

关 键 词:β-呋喃果糖苷酶,指数流加补料,比生长速率控制,重组大肠杆菌,高密度发酵

High density fermentation for beta-fructofuranosidase production by recombinant Escherichia coli BL21(DE3) using exponential fed-batch culture strategy
WU Bin,PEI Zhi-Peng,CHENG Cheng,WU Bin and HE Bing-Fang.High density fermentation for beta-fructofuranosidase production by recombinant Escherichia coli BL21(DE3) using exponential fed-batch culture strategy[J].Microbiology,2017,44(4):766-773.
Authors:WU Bin  PEI Zhi-Peng  CHENG Cheng  WU Bin and HE Bing-Fang
Institution:1. College of Biotechnology and Pharmaceutical Engineering, Nanjing Tech University, Nanjing, Jiangsu 211816, China,1. College of Biotechnology and Pharmaceutical Engineering, Nanjing Tech University, Nanjing, Jiangsu 211816, China,1. College of Biotechnology and Pharmaceutical Engineering, Nanjing Tech University, Nanjing, Jiangsu 211816, China,1. College of Biotechnology and Pharmaceutical Engineering, Nanjing Tech University, Nanjing, Jiangsu 211816, China and 2. School of Pharmaceutical Sciences, Nanjing Tech University, Nanjing, Jiangsu 211816, China
Abstract:
Keywords:Beta-fructofuranosidase  Exponential fed-batch culture  Specific growth rate control  Recombinant Escherichia coli  High density fermentation
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