| 细胞内RT－PCR扩增免疫球蛋白重链可变区基因 |
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| 引用本文： | 李昌龙,赵满仓,王抒,蒋雷,李健斋. 细胞内RT－PCR扩增免疫球蛋白重链可变区基因[J]. 生物化学与生物物理进展, 1995, 22(4): 380-382 |
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| 作者姓名： | 李昌龙 赵满仓 王抒 蒋雷 李健斋 |
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| 作者单位： | 卫生部北京老年医学研究所;解放军石家庄空军医院;卫生部北京老年医学研究所;卫生部北京老年医学研究所;卫生部北京老年医学研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目. |
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| 摘 要： | 通常,逆转录PCR(RT-PCR)需要高质量的mRNA,操作过程复杂,效率低且易受到RNase的破坏,为了简化操作,提高效率,用10%甲醛盐溶液固定杂交瘤细胞,以Np-40渗透化处理细胞后做RT-PCR,获得了大约350bp的特异性免疫球蛋白重链可变区基因片段,与用同一对引物得到的常规RT-PCR扩增产物一致.这项技术可用于获得特定结构基因片段,连结并扩增嵌合蛋白基因及构建多克隆免疫球蛋白文库等.
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| 关 键 词： | 细胞内RT－PCR 重链可变区基因 渗透化处理 |
| 收稿时间： | 1994-08-09 |
| 修稿时间： | 1994-11-09 |
In-Cell Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction(In-cell-RT-PCR):Amplifying the Reverse Transcripted lmmunoglobulin Heavy Chain Gene Fragment within Hybridoma Cells |
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| Li Changlong,Zhao Mancang,Wang Shu,Jiang Lei and Li Jianzhai. In-Cell Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction(In-cell-RT-PCR):Amplifying the Reverse Transcripted lmmunoglobulin Heavy Chain Gene Fragment within Hybridoma Cells[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 1995, 22(4): 380-382 |
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| Authors: | Li Changlong Zhao Mancang Wang Shu Jiang Lei Li Jianzhai |
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| Affiliation: | Biochemistry Laboratory, Beijing Institute of Geriatrics, Ministry of Public Health;Department of Clinical Laboratory Medicine, Shijiazhuang Air Force Hospital;Biochemistry Laboratory, Beijing Institute of Geriatrics, Ministry of Public Health;Biochemistry Laboratory, Beijing Institute of Geriatrics, Ministry of Public Health;Biochemistry Laboratory, Beijing Institute of Geriatrics, Ministry of Public Health |
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