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Pfk基因过表达对乳酸乳球菌N8产nisin速率的影响
引用本文:朱多龙,赵凯,徐海津,白艳玲,张秀明,乔明强. Pfk基因过表达对乳酸乳球菌N8产nisin速率的影响[J]. 微生物学报, 2015, 55(4): 440-439
作者姓名:朱多龙  赵凯  徐海津  白艳玲  张秀明  乔明强
作者单位:南开大学生命科学学院,天津300071,南开大学生命科学学院,天津300071,南开大学生命科学学院,天津300071,南开大学生命科学学院,天津300071,南开大学生命科学学院,天津300071,南开大学生命科学学院,天津300071
基金项目:国家自然科学基金项目(30970095)
摘    要:【目的】通过基因工程手段增加糖酵解途径中编码限速酶6-磷酸果糖激酶基因Pfk在乳酸链球菌素(nisin)产生菌Lactococcus lactis N8中的表达,增快nisin的产生,从而提高单位时间内nisin的产量,缩短发酵周期。【方法】将pfk基因及编码以c AMP为依赖的蛋白激酶催化亚基基因pka C克隆到表达质粒p MG36e上,将共表达重组质粒转入L.lactis N8中,使Pfk-pka C基因过量表达,得到重组菌株L.lactis N8-p MG36epfk-pka C,并比较该重组菌株与野生菌的生长曲线、胞内6-磷酸果糖激酶活性、发酵上清液的抑菌活性及效价,并从转录水平分析两株菌nis A及pfk-pka C的转录差异,比较野生菌与重组菌在不同葡萄糖含量下培养产nisin的变化。【结果】Pfk基因与pka C基因的过表达对重组菌的生长速度没有明显的影响,却能提高重组菌产nisin的速度,在发酵10 h时nisin的产量比野生菌提高了20%,使得发酵周期缩短近2 h。野生菌及重组菌在不同葡萄糖含量下培养发酵上清液的nisin效价没有明显的变化。【结论】糖酵解途径中6-磷酸果糖激酶基因Pfk的过表达可以加快乳酸乳球菌N8产nisin的速率,缩短发酵周期。

关 键 词:乳酸乳球菌  乳酸链球菌素(nisin)  6-磷酸果糖激酶  抑菌活性  效价
收稿时间:2014-08-13
修稿时间:2014-11-11

Effect of 6-phosphofructokinase gene-pfk overexpression on nisin production in Lactococcus lactis N8
Duolong Zhu,Kai Zhao,Haijin Xu,Yanling Bai,Xiuming Zhang and Mingqiang Qiao. Effect of 6-phosphofructokinase gene-pfk overexpression on nisin production in Lactococcus lactis N8[J]. Acta microbiologica Sinica, 2015, 55(4): 440-439
Authors:Duolong Zhu  Kai Zhao  Haijin Xu  Yanling Bai  Xiuming Zhang  Mingqiang Qiao
Affiliation:Duolong Zhu;Kai Zhao;Haijin Xu;Yanling Bai;Xiuming Zhang;Mingqiang Qiao;College of Life Sciences,Nankai University;
Abstract:
Keywords:
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