人类14—3—3ζ和GCH1蛋白相互作用的初步研究

目的寻找人类14-3-3ζ白的相互作用蛋白，为进一步揭示14-3-3ζ的作用机理提供线索。方法以14-3—3ζ为“诱饵”，利用酵母双杂交系统筛选人脑cDNA文库得到“猎物”蛋白，通过GSTpulldown技术和哺乳动物细胞内免疫共沉淀技术验证14-3-3ζ和“猎物”蛋白的特异性结合。结果首次利用酵母双杂交cDNA文库筛选技术发现了14-3-3ζ能够与GTP环化水解酶I（GTP cyclohydrolase1，GCHl）相互作用，并通过了体内和体外的蛋白质结合实验证实了这两个蛋白质之间的特异性相互作用。结论发现并验证了14-3-3ζ与GCH1之间的蛋白质相互作用，为进一步深入研究这两种蛋白质的功能及所引起的相关疾病的发病机理提供了新的线索。