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芹菜NHL-like蛋白基因克隆与表达分析
引用本文:李岩,王 枫,谭国飞,贾晓玲,蒋倩,熊爱生.芹菜NHL-like蛋白基因克隆与表达分析[J].植物遗传资源学报,2014,15(4):788-794.
作者姓名:李岩  王 枫  谭国飞  贾晓玲  蒋倩  熊爱生
作者单位:南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,南京农业大学园艺学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31272175),教育部新世纪优秀人才支持计划(NCET-11-0670),江苏省杰出青年基金项目(BK20130027), 江苏高校优势学科建设项目(2011PAPD),江苏省双创计划(2011JSSC)。
摘    要:植物生长发育过程中会遭遇各种病原物的攻击,植物为了应对这些危害并适应外界的生存竞争,逐渐演化出了复杂的防御机制。NHL基因家族庞大,部分NHL基因受病原物诱导后会过量表达,增强植物对多种病原菌的抗性,是与植物防御机制密切相关的蛋白。本研究以津南实芹和美国西芹2个芹菜品种为试验材料,分别克隆出NHL-like蛋白基因AgNHL。序列分析表明,上述2种芹菜的AgNHL基因序列均含636 bp的开放阅读框,编码211个氨基酸。2种芹菜碱基序列,只有第36位不同,津南实芹为T,美国西芹为C,2种碱基序列相似性高达99.84%,编码的氨基酸序列相同。进化分析显示,2种芹菜的NHL-like蛋白与葡萄、大豆等植物的相似度较高,在第80~185氨基酸间含一个LEA-2蛋白保守结构域。荧光定量PCR结果表明,AgNHL基因主要在芹菜茎中表达,根中表达量最低,有明显组织特异性,品种差异也很显著。对2种芹菜分别进行4℃低温、38℃高温、20%PEG处理、0.2 mol/L NaCl处理2 h表达分析显示,低温、盐处理下该基因表达量明显上升。

关 键 词:芹菜  NHL-like蛋白  基因克隆  荧光定量PCR  表达分析
收稿时间:9/5/2013 12:00:00 AM
修稿时间:2013/12/2 0:00:00

Cloning and expression pattern analysis of NHL-like protein gene in celery
LI Yan;WANG Feng;TAN Guo-fei;JIA Xiao-ling;JIANG Qian;XIONG Ai-sheng.Cloning and expression pattern analysis of NHL-like protein gene in celery[J].Journal of Plant Genetic Resources,2014,15(4):788-794.
Authors:LI Yan;WANG Feng;TAN Guo-fei;JIA Xiao-ling;JIANG Qian;XIONG Ai-sheng
Institution:LI Yan;WANG Feng;TAN Guo-fei;JIA Xiao-ling;JIANG Qian;XIONG Ai-sheng;State Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement,Ministry of Agriculture Key Laboratory of Biology and Germplasm Enhancement of Horticultural Crops in East China,College of Horticulture,Nanjing Agricultural University;
Abstract:
Keywords:Apium graveolens  NHL-like protein  Gene clone  Real-time quantitative PCR  Gene expression
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