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| 序列特异的双链RNA可解除CHIP对TGF-β信号通路的抑制作用 | |
| 作者姓名： | 徐夏莲 辛宏 王春华 王银银 常智杰 |
| 作者单位： | 清华大学生物科学与技术系,北京,100084 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No :3 9970 3 69，3 60 70 70 3 )资助~~ |
| 摘 要： | 根据热休克蛋白Hsc70C端结合蛋白CHIP(carboxylterminusofHsc70 interactingprotein ,CHIP)cDNA上特异序列合成寡核苷酸片段 ,以pBS U6为载体 ,构建产生CHIPdsRNA (doublestrandedRNA ,dsRNA)的表达质粒pBS U6 CHIPi .免疫印迹和免疫染色结果显示 ,pBS U6 CHIPi可以高效、特异地抑制哺乳动物细胞内CHIP基因的表达 .为进一步研究CHIP在TGF β信号通路中的调控作用 ,利用pBS U6 CHIPi从细胞水平上封闭CHIP基因表达 ,观察TGF β介导的基因转录活性的变化 .荧光素酶报告分析 (luciferaseassay)结果显示 ,CHIP明显抑制TGF β介导的下游基因的转录活性 ,而转染pBS U6 CHIPi能有效解除CHIP的抑制作用 ,从而提高TGF β信号通路转录水平 ,从逆向角度进一步验证了CHIP在TGF β信号途径中可能具有抑制性的调控功能 |
| 关 键 词： | CHIP dsRNA 免疫印迹 免疫染色 荧光素酶报告分析(luciferaseassay) |
| 收稿时间： | 2004-08-20 |
| 修稿时间： | 2003-07-18 |
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