| 鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白1活化cyclinD1的表达 |
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| 引用本文： | 赵晓荣,王承兴,罗非君,顾焕华,唐敏,夏林庆,邓琳,易薇,邓锡云,曹亚. 鼻咽癌细胞中EB病毒编码的潜伏膜蛋白1活化cyclinD1的表达[J]. 生物化学与生物物理进展, 2001, 28(5): 704-710 |
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| 作者姓名： | 赵晓荣 王承兴 罗非君 顾焕华 唐敏 夏林庆 邓琳 易薇 邓锡云 曹亚 |
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| 作者单位： | 中南大学湘雅医学院肿瘤研究所长沙410078 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金杰出青年基金(39525022)和国家重点基础研究发展规划(973)项目(G1998051201). |
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| 摘 要： | 为了探讨EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(EBV-LMP1)促进细胞增殖，参与EBV相关疾病致瘤的分子机制，研究了LMP1在鼻咽癌细胞中调节cyclinD1表达，进而影响细胞周期行进及细胞恶性表型改变，并初步确定了LMP1发挥该功能的结构域.利用已建株的Tet-on-LMP1-HNE2鼻咽癌细胞系，蛋白质印迹实验分析LMP1诱导cyclinD1蛋白质表达的表达动力学，包括时间效应及剂量效应；利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1，以载体型细胞为对照，确定LMP1活化cyclinD1表达的结构域.同时结合基因诱导表达及反义寡聚核酸技术阻断基因表达的实验方法，进一步确定LMP1上调的cyclinD1功能，即对细胞周期行进及细胞恶性表型的影响.结果表明LMP1确实可以诱导cyclinD1的表达（2～4倍），且诱导具有时间依赖性及剂量依赖性；利用三种LMP1功能区缺失的突变体及野生型LMP1，以载体型细胞为对照，结合报道基因分析法，确定与空白载体细胞系比较，野生型LMP1从转录水平可反式激活cyclinD1报道基因活性约11.2倍，其中CTAR1及CTAR2均可活化cyclinD1表达，但以CTAR2为主，与野生型LMP1诱导cyclinD1反式激活活性比较，CTAR1缺失导致cyclinD1报道基因活性下降23.6%，CTAR2缺失导致cyclinD1活性下降约80.7%,C端均缺失时cyclinD1活性只有野生型的17.7%.流式细胞仪分析显示，强力霉素诱导后cyclinD1高表达的细胞停留于G0/G1期明显减少，较未经诱导的细胞，从66.42%减至56.55%，而进入S期及G2/M期的细胞明显增多.在稳定表达LMP1的细胞中，与导入正义LMP1比较，导入反义LMP1 PS-ODNs及反义cylinD1，可以使细胞软琼脂集落形成率明显降低(从30.48%分别降至15.21%,21.76%).EBV-LMP1可以活化cyclinD1的表达，且发挥这种功能的结构域以CTAR2为主，活化的cyclinD1参与细胞周期行进，抑制LMP1及cyclinD1的表达均可导致细胞软琼脂集落形成率降低.
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| 关 键 词： | EB病毒，潜伏膜蛋白1，周期蛋白D1 |
| 收稿时间： | 2000-11-16 |
| 修稿时间： | 2000-11-16 |
The Epstein-Barr Virus Encoded Latent Membrane Protein 1(EBV-LMP1) Activates Expression of CyclinD1 |
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| ZHAO Xiao-Rong,WANG Cheng-Xing,LUO Fei-Jun,GU Huan-Hu,TANG Min,XIA Lin-Qing,DENG Lin,YI Wei,DENG Xi-Yun and CAO Ya. The Epstein-Barr Virus Encoded Latent Membrane Protein 1(EBV-LMP1) Activates Expression of CyclinD1[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2001, 28(5): 704-710 |
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| Authors: | ZHAO Xiao-Rong WANG Cheng-Xing LUO Fei-Jun GU Huan-Hu TANG Min XIA Lin-Qing DENG Lin YI Wei DENG Xi-Yun CAO Ya |
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| Affiliation: | Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China;Cancer Research Institute, Xiangya School of Medicine, Central South University, Changsha 410078, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | epstein-barr virus latent membrane protein 1 cyclin D1 |
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