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链霉菌和大肠杆菌穿梭质粒载体的构建
引用本文:谭华荣,何松,庄增辉,薛禹谷. 链霉菌和大肠杆菌穿梭质粒载体的构建[J]. 遗传学报, 1990, 0(4)
作者姓名:谭华荣  何松  庄增辉  薛禹谷
作者单位:中国科学院微生物研究所 北京(谭华荣,何松,庄增辉),中国科学院微生物研究所 北京(薛禹谷)
摘    要:本文报道了链霉菌和大肠杆菌穿梭质粒载体pSE-3的构建;把具有双启动子的大肠杆菌的质粒pGEM-3与新霉素抗性基因启动子缺失的链霉菌的探针质粒pIJ486分别用BamHI和BglⅡ酶切,T4 DNA连接酶连接后转化到E.coli HB101(Amp(?),Neo(?)),所得重组质粒能强启动pIJ486质粒上的氨基糖苷磷酸转移酶基因(aph),并使新霉素抗性基因在大肠杆菌中得到强表达。此重组质粒被命名为pSE-3,当其转化到变青链霉菌TK54(Tsr(?),Neo(?))的原生质体前,新霉素抗性基因亦能得到强表达。酶切结果表明,构建的具有两个启动子的穿梭质粒载体pSE-3上有HindⅢ和EcoRI的单酶位点,拷贝数约为39。经再转化和传代50代等研究表明,穿梭质粒载体pSE-3在链霉菌和大肠杆菌中均是稳定的。为某些有应用价值的目的基因在大肠杆菌和链霉菌中的克隆与表达提供了一个有价值的穿梭质粒载体。

关 键 词:穿梭质粒载体  链霉菌  大肠杆菌

The Construction of Shuttle Plasmid Vector of Streptomyces and E. colt
Tan Huarong He Song Zhuang Zenghui Xue Yugu. The Construction of Shuttle Plasmid Vector of Streptomyces and E. colt[J]. Journal of Genetics and Genomics, 1990, 0(4)
Authors:Tan Huarong He Song Zhuang Zenghui Xue Yugu
Abstract:
Keywords:Shuttle plasmid vector   Streplomyces   E. coli  
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