| 奶山羊转基因供核细胞的再饥饿对核移植胚胎发育的影响 |
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| 引用本文： | 陈建泉,张爱民,陈娟,徐旭俊,刘国辉,朱敏,刘明刚,成国祥.奶山羊转基因供核细胞的再饥饿对核移植胚胎发育的影响[J].分子细胞生物学报,2005,38(3):241-246. |
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| 作者姓名： | 陈建泉 张爱民 陈娟 徐旭俊 刘国辉 朱敏 刘明刚 成国祥 |
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| 作者单位： | 上海转基因研究中心，同济大学生命科学与技术学院，上海转基因研究中心，上海转基因研究中心，上海转基因研究中心，上海转基因研究中心，上海转基因研究中心，上海转基因研究中心 上海 201203 同济大学生命科学与技术学院上海 200092，上海 200092，上海 201203，上海 201203，上海 201203，上海 201203，上海 201203，上海 201203 同济大学生命科学与技术学院上海 200092 |
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| 基金项目： | 本项目获得“836”项目（批准号2002AA206652），上海市科委重大产业化项目（批准号004319001）资助 |
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| 摘 要： | 为提高转基因奶山羊体细胞核移植胚胎早期发育率,将经转染外源基因的山羊胎儿成纤维细胞经饥饿培养(含0.5?S的DMEM)5天后分成两部分:第一部分细胞-80℃或液氮冻存,试验前复苏后直接用作供核细胞(试验组Ⅰ),或复苏后恢复培养(含10% FCS的DMEM)2-5天后再饥饿5天用作供核细胞(试验组Ⅱ);第二部分细胞作传代培养(含10% FCS的DMEM)2天后再饥饿5 天用作供核细胞(试验组Ⅲ)。将上述不同处理的供核细胞进行细胞周期与存活率的检测,并将该供核细胞移入去除遗传物质的山羊MⅡ期卵母细胞的卵周隙内,经电融合、化学激活后,将核移植(NT)胚胎经0.8%琼脂糖包理后移入临时寄母输卵管内,培养6天后回收并观察NT胚胎的早期发育。结果,试验组Ⅱ所用供核细胞中G_0/G_1期细胞所占比例及其存活率分别为95.68%、99.9%,均显著地高于试验组Ⅰ(88.66%、80%);试验组Ⅱ的桑椹及囊胚期NT胚胎的发育率(66.09%)显著地高于试验组Ⅰ(22.00%)与试验组Ⅲ(50.51%)。将以上发育的NT胚胎分别移入同步发情的受体后,35 天作B超妊娠诊断,试验组Ⅱ的受体妊娠率为45.83%,显著地高于试验组Ⅰ(20.00%)与试验组Ⅲ(9.58%)。流式细胞仪分析结果表明,饥饿后的供核细胞经冷冻,复苏后恢复培养2-5天,再经饥饿处理,能显著地提高G_0/G_1期细胞的比例及细胞存活率;应用该细胞所组建的NT胚不仅具有较高的桑椹与囊胚期发育率,而且具有较高的受体妊娠率。
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| 关 键 词： | 核移植 饥饿 转基因细胞 胚胎发育 冷冻 |
| 修稿时间： | 2004年11月12 |
EFFECT ON DEVELOPMENT IN NT EMBRYOS AFTER TRANSPLANTATION OF NUCLEI DERIVED FROM TRANSFECTED GOAT FETAL FIBROBLASTS SUFFERING DIFFERENT TREATMENTS INTO ENUCLEATE EGGS |
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| CHEN Jian Quan,ZHANG Ai Min,CHEN Juan,XU Xu Jun,LIU Guo Hui,ZHU Min,LIU Ming Gang,CHENG Guo Xiang Shanghai Transgenic Research Center,Shanghai School of Life Science and Technology,Tongji university,Shanghai.EFFECT ON DEVELOPMENT IN NT EMBRYOS AFTER TRANSPLANTATION OF NUCLEI DERIVED FROM TRANSFECTED GOAT FETAL FIBROBLASTS SUFFERING DIFFERENT TREATMENTS INTO ENUCLEATE EGGS[J].Journal of Molecular Cell Biology,2005,38(3):241-246. |
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| Authors: | CHEN Jian Quan ZHANG Ai Min CHEN Juan XU Xu Jun LIU Guo Hui ZHU Min LIU Ming Gang CHENG Guo Xiang Shanghai Transgenic Research Center Shanghai School of Life Science and Technology Tongji university Shanghai |
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| Institution: | CHEN Jian Quan,ZHANG Ai Min,CHEN Juan,XU Xu Jun,LIU Guo Hui,ZHU Min,LIU Ming Gang,CHENG Guo Xiang Shanghai Transgenic Research Center,Shanghai 201203 School of Life Science and Technology,Tongji university,Shanghai 200092 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nuclear transfer Starvation Transgenic somatic cell Embryo development Refrigeration |
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