| 利用Gateway技术构建慢病毒载体及其在鸡囊胚细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 胡雄贵,肖定福,邓缘,燕海峰. 利用Gateway技术构建慢病毒载体及其在鸡囊胚细胞中的表达[J]. 生物技术, 2007, 17(4): 18-21 |
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| 作者姓名： | 胡雄贵 肖定福 邓缘 燕海峰 |
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| 作者单位： | 1. 湖南省畜牧兽医研究所,湖南,长沙,410131
2. 湖南农业大学动物科学技术学院,湖南,长沙,410128 |
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| 基金项目： | 中-捷克合作项目;湖南省科技攻关项目;湖南省长沙市科技计划项目 |
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| 摘 要： | 目的:建立慢病毒载体介导的外源基因在动物中表达的模式。方法:通过PCR扩增出带EGFP基因和特异性结合位点的DNA序列,并应用Gateway技术构建了带EGFP基因的pLenti6/v5-DEST慢病毒载体。利用磷酸钙介导慢病毒4质粒系统在包装细胞中转染,收集并浓缩产生的病毒颗粒,通过感染293FT细胞测定慢病毒滴度。结果:通过PCR扩增后测序分析,表明慢病毒载体构建正确。病毒滴度测定结果为2×107TU/mL。并用慢病毒对鸡囊胚细胞进行感染,获得了较强的表达效果。结论:慢病毒载体系统所产生的病毒颗粒对动物细胞具有较强的感染能力,为慢病毒载体在转基因家禽研究中的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 293FT细胞 鸡囊胚细胞 |
| 文章编号： | 1004-311X（2007）04-0018-04 |
| 收稿时间： | 2007-03-29 |
| 修稿时间： | 2007-04-24 |
Construction of Lentiviral Vectors by Gateway Method and Its Expression in Chicken Blastodermal Cell |
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| HU Xiong-gui,XIAO Ding-fu,DENG Yuan,YAN Hai-feng. Construction of Lentiviral Vectors by Gateway Method and Its Expression in Chicken Blastodermal Cell[J]. Biotechnology, 2007, 17(4): 18-21 |
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| Authors: | HU Xiong-gui XIAO Ding-fu DENG Yuan YAN Hai-feng |
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| Keywords: | Gateway EGFP |
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