| 肠道病毒71型外壳蛋白VP1在Pichia pastoris酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 杨国威,何雅清,薛颖,周世力,马骊,金奇.肠道病毒71型外壳蛋白VP1在Pichia pastoris酵母中的表达[J].病毒学报,2003,19(2):114-117. |
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| 作者姓名： | 杨国威 何雅清 薛颖 周世力 马骊 金奇 |
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| 作者单位： | 1. 病毒基因工程国家重点实验室,北京,100052
2. 深圳市卫生防疫站,深圳,518001 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划);; |
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| 摘 要： | 利用逆转录聚合酶链式反应(RT PCR)扩增肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白VP1基因,经序列测定证实后,构建重组表达质粒pPIC9K/VP1,转化Pichiapastoris酵母宿主菌GS115,甲醇诱导表达。SDS PAGE分析显示:表达产物的分子量约为34kD,与天然VP1大小一致。凝胶薄层扫描分析显示:目的蛋白表达量占培养上清总蛋白的60%以上。ELISA实验表明,重组蛋白VP1具有较好的抗原性。使用饱和硫酸铵分级沉淀法初步纯化的表达产物,能够较特异性地与EV71感染者血清中的抗体产生反应,而且与抗柯萨奇病毒A16特异性抗体不产生反应。通过利用表达产物作为抗原,对156份血清的检测初步证实,重组蛋白VP1可以作为检测EV71感染的的检测用抗原。
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| 关 键 词： | 肠道病毒71型 VP1 Pichiapastoris酵母 基因表达 |
| 文章编号： | 1000-8721(2003)02-0114-04 |
| 修稿时间： | 2002年7月31日 |
Expression of Capsid Protein VP1 of Enterovirus Type 71 in Pichia Pastoris |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | enterovirus type 71 VP1 Pichia Pastoris gene expression |
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