| 十字花科植物线粒体DNA的提取和纯化 |
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| 引用本文： | 曾秀存,孙万仓,孟亚雄,范惠玲,王保成,邵登魁,张金文.十字花科植物线粒体DNA的提取和纯化[J].西北植物学报,2005,25(6):1137-1142. |
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| 作者姓名： | 曾秀存 孙万仓 孟亚雄 范惠玲 王保成 邵登魁 张金文 |
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| 作者单位： | 甘肃农业大学,农学院,兰州,730070 |
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| 基金项目： | 甘肃省自然科学基金项目 ZS991-A2 1-0 43 -N，ZS0 3 1-A2 5 -0 41-D 资助 |
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| 摘 要： | 以十字花科植物芸芥 Eruca sativa 、白菜型油菜 Brassica rapa 和甘蓝型油菜 Brassica napus :武39- 1、武4 3- 1、武5 0 - 2为试材,在蔗糖衬垫法分离纯化m t DNA方法优点的基础上,通过4组不同离心力配比,采用差速离心法、改变缓冲液A的成分以及增加缓冲液的用量,建立了一种简便提取十字花科植物mt DNA方法.研究结果表明:分离细胞破碎组织的离心力、分离线粒体的离心力以及纯化线粒体时的离心力分别为10 0 0 g、2 0 0 0 0 g、180 0 0 g时可分离到高产量的线粒体,且在缓冲液A 蔗糖0 .5 m ol·L- 1 ,Tris- Cl5 0 mm ol·L- 1 ,EDTA5 m mol·L- 1 ,BSA 0 .1% ,PVP 0 .5 % ,0 .1%β-巯基乙醇,p H=7.5 中加入0 .5 % PVP可提高mt DNA的产量,经DNA电泳检测、RAPD扩增证明此方法得到的mt DNA可完全达到RAPD标记和其它分子生物学研究的要求.
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| 关 键 词： | 十字花科植物 线粒体DNA 提取 mtDNA 分子生物学研究 β-巯基乙醇 RAPD标记 RAPD扩增 白菜型油菜 离心力 缓冲液 分离纯化 细胞破碎 研究结果 电泳检测 PVP 离心法 高产量 蔗糖 |
| 文章编号： | 1000-4025(2005)06-1137-06 |
Extraction and Purification of mtDNA in Crucifer |
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| ZENG Xiu-cun,SUN Wan-cang,MENG Ya-xiong,FAN Hui-ling,WANG Bao-cheng,SHAO Deng-kui,ZHANG Jin-wen.Extraction and Purification of mtDNA in Crucifer[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2005,25(6):1137-1142. |
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| Authors: | ZENG Xiu-cun SUN Wan-cang MENG Ya-xiong FAN Hui-ling WANG Bao-cheng SHAO Deng-kui ZHANG Jin-wen |
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| Institution: | ZENG Xiu-cun,SUN Wan-cang *,MENG Ya-xiong,FAN Hui-ling,WANG Bao-cheng,SHAO Deng-kui,ZHANG Jin-wen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | crucifer mtDNA extraction purification |
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