| 抗CD20嵌合抗体的表达与活性检测 |
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| 引用本文： | 师明磊,胡显文,陈惠鹏,高丽华,李世崇.抗CD20嵌合抗体的表达与活性检测[J].中国生物工程杂志,2005,25(7):34-39. |
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| 作者姓名： | 师明磊 胡显文 陈惠鹏 高丽华 李世崇 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所, 北京 100071 |
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| 摘 要： | 表达了基因重组抗CD20嵌合抗体并对其生物学活性进行了初步鉴定。设计合成轻、重链可变区序列;提取血液RNA,通过RT-PCR得到人κ、IgG1的轻、重链恒定区序列。运用重叠延伸PCR,连接可变区与恒定区,将轻、重链基因连接至pIRES双表达载体。将质粒以阳离子脂质体转染CHO细胞,ELISA挑选阳性克隆,共获得7株表达较高的克隆,表达量约为2mg/L。扩大培养阳性克隆anti-CD20-1B3,收获上清,以蛋白A进行亲和层析纯化表达蛋白。SDS-PAGE检测表明纯化纯度达到95％,蛋白相对分子量与理论值吻合。以CD20+细胞Raji、Daudi、Ramous检测,表明该抗体能与CD20抗原特异性结合,体外杀伤试验说明抗体能够杀伤CD20+淋巴瘤细胞。
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| 关 键 词： | 非霍奇金淋巴瘤 CD20 单克隆抗体 嵌合抗体 |
| 收稿时间： | 2005-01-27 |
| 修稿时间： | 2005年1月27日 |
Construction, Expression and Characterization of Anti-CD20 Chimeric Monoclonal Antibody |
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| SHI Ming-lei,HU Xian-wen,CHEN Hui-peng,GAO Li-Hua,LI Shi-Chong.Construction, Expression and Characterization of Anti-CD20 Chimeric Monoclonal Antibody[J].China Biotechnology,2005,25(7):34-39. |
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| Authors: | SHI Ming-lei HU Xian-wen CHEN Hui-peng GAO Li-Hua LI Shi-Chong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lymphoma Non-Hodgkin' s CD20 Monoclonal antibody Chimeric antibody |
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