人鼻咽癌相关基因NGX6在大肠杆菌中的诱导表达及纯化 |
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引用本文: | 李小玲,李江,黄宇琛,董莉,张秋红,谭琛,李桂源.人鼻咽癌相关基因NGX6在大肠杆菌中的诱导表达及纯化[J].生命科学研究,2003,7(2):151-155. |
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作者姓名: | 李小玲 李江 黄宇琛 董莉 张秋红 谭琛 李桂源 |
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作者单位: | 中南大学,湘雅医学院,肿瘤研究所,中国湖南,长沙,410078 |
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基金项目: | 国家高技术"863"计划资助项目(102 01 05),国家重点基础研究发展规划项目(973)(G1998051008),国家自然科学基金资助项目(30000096),国家自然科学基金资助项目(30271403) |
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摘 要: | NGX6是一个新克隆的鼻咽癌抑瘤基因候选者,为了进一步制备抗NGX6编码蛋白质的抗体和研究它的功能,本研究拟在原核表达系统中表达并纯化出NGX6蛋白.采用多聚酶链式反应(PCR)方法扩增出NGX6基因蛋白编码序列,构建该基因的融合表达质粒pGEX3X/NGX6,导入大肠杆菌中,IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳.Western hlot鉴定.用GST融合蛋白纯化试剂盒纯化融合蛋白.结果显示构建的融合表达质粒酶切和测序鉴定阅读框架正确,导入大肠杆菌中诱导后出现一条42kDa的新蛋白带,主要存在于细菌沉淀中,占总蛋白的26%,Western blot鉴定其为GST/NGX6融合蛋白,并进一步纯化出融合蛋白.研究表明NGX6基因编码蛋白质能够在原核细胞中表达,并能纯化出该种蛋白,为进一步深入研究该蛋白质的结构与功能打下了基础.
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关 键 词: | 鼻咽癌 基因NGX6 大肠杆菌 诱导表达 蛋白纯化 |
文章编号: | 1007-7847(2003)02-0151-05 |
修稿时间: | 2003年2月21日 |
Expression and Purification of NGX6 in Escherichia coli |
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Abstract: | |
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Keywords: | NGX6 gene fusion protein gene expression purification |
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