| 截短的HCV NS3蛋白的表达、纯化及应用 |
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| 引用本文： | 郭泰林,叶林柏,茆灿泉. 截短的HCV NS3蛋白的表达、纯化及应用[J]. 生物技术, 2008, 18(6) |
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| 作者姓名： | 郭泰林 叶林柏 茆灿泉 |
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| 作者单位： | 1. 西南交通大学生物工程系,四川成都,610031
2. 武汉大学生命科学学院,湖北武汉,430072 |
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| 摘 要： | 目的:为了发展新一代HCV检测试剂盒,使包被的NS3蛋白能提高其检测的精确度与准确度.方法:通过生物信息学方法选定目标蛋白为HCV1263a.a～1583a.a,应用PCR方法克隆出编码此部分NS3蛋白的DNA序列,连接到表达载体pQE30构建重组子pQNS3,转化工程菌株JM109后诱导表达,表达产物通过Western-blot实验证实,用Ni-NTA-Superflow亲和层析柱纯化,采用ELISA方法检测纯化的蛋白在免疫检测中的应用.结果:工程菌株在IPIG诱导下表达出N端含6个组氨酸的NS3融合蛋白,分子量约为36kDa,利用纯化的目标蛋白对40份HCV抗体阳性参考品,蛋白检测的符合率为77.5%(31/40);对40份阴性参考品,检测符合率为97.5%(39/40).结论:表达的NS3融合蛋白,具有很好的应用价值,可以应用于新一代HCV检测试剂盒以及对NS3蛋白功能的研究.
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒 NS3蛋白 表达 纯化 应用 |
Expression,Purification and Usage of Truncated HCV NS3 Protein |
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| GUO Tai-lin,YE Lin-bo,MAO Can-quan. Expression,Purification and Usage of Truncated HCV NS3 Protein[J]. Biotechnology, 2008, 18(6) |
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| Authors: | GUO Tai-lin YE Lin-bo MAO Can-quan |
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