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改良DNA染色法对支原体检测的效果评估
引用本文:王晓燕,刘军,于佳,王凯,房世娣,魏然,冯德杰.改良DNA染色法对支原体检测的效果评估[J].微生物学免疫学进展,2022(4):31-36.
作者姓名:王晓燕  刘军  于佳  王凯  房世娣  魏然  冯德杰
作者单位:兰州生物制品研究所有限责任公司质量检定室甘肃省疫苗工程技术研究中心
摘    要:目的 评估改良的DNA染色法检测支原体的效果。方法 使用无水乙醇为固定液和DAPI为荧光染料进行改良的DNA染色法,通过改变细胞接种浓度、细胞培养时间、接种支原体的浓度以及接种猪鼻支原体、口腔支原体和精氨酸支原体,观察支原体污染细胞进行DNA染色后的效果变化。结果 Vero细胞接种浓度在1.0×105个/mL时,DNA染色效果最好;支原体在传代培养5 d后进行DNA染色效果更好;接种支原体污染的细胞上清,胞核外有较少的蓝色荧光,而接种支原体污染的细胞培养物的胞核外可见大量的蓝色荧光;猪鼻支原体的DNA染色效果比口腔支原体和精氨酸支原体的DNA染色效果好。结论 改变细胞接种浓度、细胞培养时间、支原体浓度以及种类,都能观察到不同的DNA染色结果,从而证明改良的DNA染色法也能用于支原体DNA染色检查。

关 键 词:DNA染色法  支原体  Vero细胞  细胞培养  DAPI
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