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cry8E启动子指导的非晶体蛋白GabR在苏云金芽胞杆菌HD73菌株中的表达
引用本文:刘春霞,武建博,彭琦,曲宁,邱丽丽,张杰,宋福平.cry8E启动子指导的非晶体蛋白GabR在苏云金芽胞杆菌HD73菌株中的表达[J].微生物学通报,2014,41(2):290-296.
作者姓名:刘春霞  武建博  彭琦  曲宁  邱丽丽  张杰  宋福平
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193;中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193;中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193;中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193;中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193;中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193;中国农业科学院植物保护研究所 植物病虫害生物学国家重点实验室 北京 100193
基金项目:国家自然科学基金项目(No. 31070083)
摘    要:【目的】利用cry8E基因启动子指导的高效表达载体pHT315-8E21b,构建一个能够在苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,简称Bt)中正确表达非晶体蛋白GabR的重组菌株。【方法】将苏云金芽胞杆菌中的功能基因gabR装载到cry8E基因启动子指导的高效表达载体pHT315-8E21b上,转入到HD73-无晶体突变株后获得重组菌株HD-8E-gabR。通过SDS-PAGE和凝胶阻滞等方法对GabR蛋白的表达和功能进行分析。【结果】通过SDS-PAGE及蛋白定量等方法首次证明了在Bt表达体系中cry8E基因启动子指导的高效表达载体能够表达非晶体蛋白GabR,且通过碱裂解的方法可以提高GabR蛋白在Bt系统中的溶解性。进一步凝胶阻滞试验证明GabR能与其调控启动子PgabT结合。【结论】证明了cry8E基因启动子指导的Bt表达系统具有大量表达非晶体类蛋白的能力。

关 键 词:苏云金芽胞杆菌,cry8E启动子,GabR蛋白,表达载体

Expression of GabR protein in Bacillus thuringiensis HD73 strain directed by cry8E promoter
LIU Chun-Xi,WU Jian-Bo,PENG Qi,QU Ning,QIU Li-Li,ZHANG Jie and SONG Fu-Ping.Expression of GabR protein in Bacillus thuringiensis HD73 strain directed by cry8E promoter[J].Microbiology,2014,41(2):290-296.
Authors:LIU Chun-Xi  WU Jian-Bo  PENG Qi  QU Ning  QIU Li-Li  ZHANG Jie and SONG Fu-Ping
Institution:State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:Bacillus thuringiensis  cry8E promoter  GabR protein  Expression vector
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