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猪CuZnSOD基因启动子的克隆鉴定及分析
引用本文:石元,陈伟,曾勇庆,祝洪磊,徐正刚,张哲,杨云,张天阳. 猪CuZnSOD基因启动子的克隆鉴定及分析[J]. 生物工程学报, 2014, 30(2): 213-222
作者姓名:石元  陈伟  曾勇庆  祝洪磊  徐正刚  张哲  杨云  张天阳
作者单位:山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018;山东农业大学动物科技学院 动物育种学实验室,山东 泰安 271018
基金项目:国家转基因重大专项 (Nos. 2011ZX08006-002,2013ZX08006-002),国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2008AA101008),山东省现代农业 (生猪) 产业技术体系建设专项,山东省农业良种工程重大项目 (No. 2011LZ013-03) 资助。
摘    要:猪铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是一种重要的抗氧化酶,其功能已被广泛研究,但CuZnSOD基因的转录调控尚不明确。为了研究猪CuZnSOD基因的核心启动子区域,并对其转录调控机制进行探讨,运用PCR方法从猪基因组克隆CuZnSOD基因5′上游调控区853 bp的片段,然后通过巢式PCR方法获得5′末端逐渐缺失的启动子系列片段,并将这些片段定向插入到荧光素酶报告基因表达载体(pGL3-Basic)中。瞬时转染小鼠胚胎细胞(NIH/3T3),利用双荧光素酶报告基因检测不同长度启动子活性。检测结果显示,在CuZnSOD基因5′上游调控区-87 bp和-266 bp处分别存在2个潜在转录起始位点,-383 bp~+67 bp启动区活性最强,进一步缺失分析发现-75 bp~-32 bp区域内含有猪CuZnSOD基因转录所必需的基础启动子序列,其中存在多个潜在的转录因子结合位点,研究结果提示这些转录因子结合位点可能是参与CuZnSOD基因转录的重要调控序列。

关 键 词:  CuZnSOD基因  启动子  双荧光素酶报告基因
收稿时间:2013-05-21

Cloning and analysis of promoter of pig copper zinc superoxide dismutase gene (CuZnSOD)
Yuan Shi,Wei Chen,Yongqing Zeng,Honglei Zhu,Zhenggang Xu,Zhe Zhang,Yun Yang and Tianyang Zhang. Cloning and analysis of promoter of pig copper zinc superoxide dismutase gene (CuZnSOD)[J]. Chinese journal of biotechnology, 2014, 30(2): 213-222
Authors:Yuan Shi  Wei Chen  Yongqing Zeng  Honglei Zhu  Zhenggang Xu  Zhe Zhang  Yun Yang  Tianyang Zhang
Abstract:
Keywords:pig   CuZnSOD gene   promoter   dual-luciferase reporter gene
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