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转糖基β-半乳糖苷酶产生菌Enterobacter agglomerans B1:筛选鉴定、发酵产酶及其合成低聚半乳糖的研究
作者姓名:卢丽丽  肖敏  徐晓东
作者单位:山东大学微生物技术国家重点实验室,山东大学国家糖工程技术研究中心,济南,250100
基金项目:国家科技攻关项目 , 国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:从土壤中筛选获得一株具有转糖基活性的β-半乳糖苷酶产生菌,综合其形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列同源分析结果,将其鉴定为成团肠杆菌(Enterobacter agglomerans)B1.通过单因子试验和正交试验,对B1菌株产转糖基β-半乳糖苷酶的培养条件进行了优化.最佳培养基主要组份为:乳糖1%,酵母粉1%,蛋白胨0.5%;发酵条件为:初始pH7.5,发酵温度25℃,发酵时间26 h.在该培养条件下产酶量为9.7U/mL.利用薄层层析技术研究了pH、温度、底物浓度和反应时间对该菌株全细胞以乳糖为底物生成低聚半乳糖的影响,确定最适反应条件为:pH7.5缓冲液配制的30%乳糖溶液;50℃反应12h.最优化反应的转糖基产物经HPLC、TLC和MS分析,确定低聚半乳糖产量为40.7%,组分为转移二糖、三糖和四糖.

关 键 词:成团肠杆菌  鉴定  转糖基β-半乳糖苷酶  发酵条件  低聚半乳糖  糖基  半乳糖苷酶  产生菌  agglomerans  Enterobacter  筛选鉴定  发酵产酶  合成  低聚半乳糖  技术研究  producing  activity  galactosidase  screening  identification  conditions  fermentation  二糖  转移  组分
文章编号:0001-6209(2008)01-0038-07
收稿时间:2007-05-14
修稿时间:2007-07-25
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