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D190V点突变提高华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的最适温度和热稳定性
引用本文:吴厚军,喻晓蔚,沙冲,徐岩.D190V点突变提高华根霉Rhizopus chinensis CCTCC M201021脂肪酶的最适温度和热稳定性[J].微生物学通报,2013,40(11):1955-1961.
作者姓名:吴厚军  喻晓蔚  沙冲  徐岩
作者单位:工业生物技术教育部重点实验室 江南大学 酿酒科学与酶技术中心 江苏 无锡 214122;工业生物技术教育部重点实验室 江南大学 酿酒科学与酶技术中心 江苏 无锡 214122;工业生物技术教育部重点实验室 江南大学 酿酒科学与酶技术中心 江苏 无锡 214122;工业生物技术教育部重点实验室 江南大学 酿酒科学与酶技术中心 江苏 无锡 214122
基金项目:国家973计划项目(No. 2011CB710800); 国家863计划项目(No. 2012AA022207, 2011AA02A209, 2011AA02A210); 中央高校基本科研业务费专项资金项目(No. JUSRP11014); 国家自然科学基金项目(No. 20802027)
摘    要:【目的】对来源于Rhizopus chinensis CCTCC M201021的脂肪酶进行了D190V定点突变, 提高该酶的最适温度和热稳定性。【方法】对毕赤酵母表达的突变酶D190V与野生型酶r27RCL进行酶学性质比较。【结果】D190V的最适温度比r27RCL高5 °C, 65 °C下的半衰期提高了一倍, 在其他性质方面, 突变酶D190V与r27RCL基本相似。【结论】通过结构分析表明, 定点突变D190V提高该酶稳定性的主要原因可能在于提高了突变位点所在的α螺旋的稳定性以及增强了稳定蛋白质结构的氢键作用力。

关 键 词:定点突变    华根霉脂肪酶    最适温度    热稳定性

Improved optimum temperature and thermostability of the lipase from Rhizopus chinensis CCTCC M201021 by site-directed mutagenesis of D190V
WU Hou-Jun,YU Xiao-Wei,SHA Chong and XU Yan.Improved optimum temperature and thermostability of the lipase from Rhizopus chinensis CCTCC M201021 by site-directed mutagenesis of D190V[J].Microbiology,2013,40(11):1955-1961.
Authors:WU Hou-Jun  YU Xiao-Wei  SHA Chong and XU Yan
Institution:Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China;Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China;Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China;Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Center for Brewing Science and Enzyme Technology, Wuxi, Jiangsu 214122, China
Abstract:
Keywords:Site-directed mutagenesis  Rhizopus chinensis lipase  Optimum temperature  Thermostability
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