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结核分枝杆菌Rv1886c的原核表达及其免疫生物学特性
引用本文:陶成武,赵丹,董慧,单发,连凯,潘志明,陈祥,殷月兰,焦新安.结核分枝杆菌Rv1886c的原核表达及其免疫生物学特性[J].微生物学报,2014,54(3):330-337.
作者姓名:陶成武  赵丹  董慧  单发  连凯  潘志明  陈祥  殷月兰  焦新安
作者单位:扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009;扬州大学,江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009
基金项目:国家“973 项目”———国家重点基础研究发展计划(2012CB518805);江苏省自然科学基金(BK2011446);2012 年度国家级大学生创新创业训练计划项目(201211117021);国家自然科学基金(31101841)
摘    要:摘要:【目的】Rv1886c基因编码的Ag85B是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)感染早期的分泌蛋白,本研究对其所诱导的免疫应答特性进行了探索。【方法】对Ag85B进行原核表达和鉴定,并通过夹心ELISA、间接ELISA及ELISPOT方法测定其诱导的细胞免疫和体液免疫应答水平。【结果】SDS-PAGE及Western blot鉴定结果表明,以包涵体形式表达的Ag85B蛋白,经变性、复性后能与结核病人的抗血清及免疫重组李斯特菌LM-Ag85B的小鼠抗血清发生特异性反应,表明His-Ag85B融合蛋白具有较好的免疫活性。将纯化的Ag85B 蛋白皮下免疫C57BL/6小鼠,夹心ELISA的测定结果表明,Ag85B蛋白免疫组诱导小鼠产生的特异性IFN-γ水平显著高于IL-4的水平(P<0.001),呈现Th1型细胞免疫应答趋势;以结核菌素PPD作为包被抗原,通过间接ELISA测定的血清抗体效价达到1∶6400,表明Ag85B也能诱导有效的体液免疫应答。此外,以尾静脉途径初次免疫小鼠42天时,ELISPOT测定结果显示,结核分枝杆菌H37Rv诱导小鼠产生Ag85B240-259特异性的IFN-γ水平极显著高于卡介苗(BCG)免疫组(P<0.001)。【结论】Ag85B蛋白能激发小鼠产生较强的Th1型细胞免疫应答和较好的体液免疫应答;BCG单次免疫后诱导小鼠产生的Ag85B特异的细胞免疫应答水平较低。本研究为揭示结核分枝杆菌的致病机理、新型疫苗的研制和早期诊断试剂的开发奠定了基础。

关 键 词:关键词:结核分枝杆菌,Ag85B,Th1型应答,体液免疫,早期感染
收稿时间:2013/4/12 0:00:00
修稿时间:2013/12/2 0:00:00

Prokaryotic expression and immunological characteristics of Mycobacterium tuberculosis Rv1886c
Chengwu Tao,Dan Zhao,Hui Dong,Fa Shan,Kai Lian,Zhiming Pan,Xiang Chen,Yuelan Yin and Xin''an Jiao.Prokaryotic expression and immunological characteristics of Mycobacterium tuberculosis Rv1886c[J].Acta Microbiologica Sinica,2014,54(3):330-337.
Authors:Chengwu Tao  Dan Zhao  Hui Dong  Fa Shan  Kai Lian  Zhiming Pan  Xiang Chen  Yuelan Yin and Xin'an Jiao
Abstract:
Keywords:
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