| N端截短对嗜酸普鲁兰芽孢杆菌普鲁兰酶酶学特性及功能的影响 |
| |
| 引用本文： | 陈阿娜,刘秀霞,戴晓峰,詹锦玲,彭枫,李璐,王芬,李松,杨艳坤,白仲虎. N端截短对嗜酸普鲁兰芽孢杆菌普鲁兰酶酶学特性及功能的影响[J]. 生物工程学报, 2016, 32(3): 355-364 |
| |
| 作者姓名： | 陈阿娜 刘秀霞 戴晓峰 詹锦玲 彭枫 李璐 王芬 李松 杨艳坤 白仲虎 |
| |
| 作者单位： | 1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122；2 安徽工程大学 生物与化学工程学院，安徽 芜湖 241000,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122,2 安徽工程大学 生物与化学工程学院，安徽 芜湖 241000,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122,1 江南大学 生物工程学院 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室，江苏 无锡 214122 |
| |
| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2013CB733602)，国家高技术研究发展计划 (863 计划) (No. 2015AA020802)，中央高校基本科研业务费专项资金 (No. JUSRP51401A)，安徽省自然科学基金青年基金 (No. 1408085QC61) 资助。 |
| |
| 摘 要： | 采用N端截短方式对嗜酸普鲁兰芽孢杆菌Bacillus acidopullulyticus普鲁兰酶进行分子精简,构建不同形式的N端截短突变体,考察截短突变对表达水平、酶学特性及实用性能的影响。研究结果表明:缺失X45后,目标蛋白几乎全部以不溶形式的包涵体形式存在;缺失CBM41可引起可溶性表达量的大幅提升。缺失CBM41(M1)、X25(M3)、亦或两结构域同时缺失(M5)的变体最适温度(60℃)和最适p H(5.0)与野生型相同。突变体M1和M5的Km值分别提高至野生型的2.4倍和3.1倍,kcat/Km测定结果显示M5催化效率下降明显。突变体M1、M3和M5对分子量较大底物的水解效率略有下降,但对小分子底物的水解效率影响不明显。野生型及突变体M1、M3和M5与糖化酶复配使用时,糖化值(DE)分别为93.6%、94.7%、94.5%和93.1%。上述结果表明,切除CBM41和/或X25结构域的普鲁兰酶变体不影响其在淀粉糖化过程中的应用,且由于分子量减小更易于异源表达,截短突变体可能更适合于工业化生产。
|
| 关 键 词： | N端截短，普鲁兰酶，表达水平，酶学特性，应用 |
| 收稿时间： | 2015-07-13 |
Effect of N-terminal truncation of Bacillus acidopullulyticus pullulanase on enzyme properties and functions |
| |
| Affiliation: | 1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China; 2 School of Biochemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, Anhui, China,1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China,1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China,1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China,1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China,1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China,1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China,2 School of Biochemical Engineering, Anhui Polytechnic University, Wuhu 241000, Anhui, China,1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China and 1 National Engineering Laboratory for Cereal Fermentation Technology, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | N-terminal truncation pullulanase expression level enzyme properties application |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
|
点击此处可从《生物工程学报》下载全文 |
|
