| 绒山羊细菌人工染色体重组及细胞转染系统 |
| |
| 引用本文： | 黄甜,曹忠洋,杨耀辉,曹更生.绒山羊细菌人工染色体重组及细胞转染系统[J].生物工程学报,2016,32(3):317-328. |
| |
| 作者姓名： | 黄甜 曹忠洋 杨耀辉 曹更生 |
| |
| 作者单位： | 1 河南大学 生命科学学院，河南 开封 475004；2 河南大学 生物工程研究所，河南 开封 475004,1 河南大学 生命科学学院，河南 开封 475004；2 河南大学 生物工程研究所，河南 开封 475004,1 河南大学 生命科学学院，河南 开封 475004；2 河南大学 生物工程研究所，河南 开封 475004,1 河南大学 生命科学学院，河南 开封 475004；2 河南大学 生物工程研究所，河南 开封 475004 |
| |
| 基金项目： | 转基因重大专项 (No. 2011zx08008-002)，国家自然科学基金 (No. 31271597) 资助。 |
| |
| 摘 要： | 绒山羊(Cashmere goat)是一类以生产山羊绒为主的山羊品种,因其绒毛纤细有光泽、轻盈、保暖而备受青睐。绒山羊角蛋白关联蛋白(Keratin associated protein,KAP)和骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic protein,BMP)在羊绒纤维毛囊细胞的增殖和分化过程中起重要作用。为了提高山羊绒的产量和品质,对包含kap6.3,kap8.1和bmp4基因的细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)进行研究。首先采用同源重组的方法对BAC进行修饰,其次将哺乳动物密码子优化过的Tol2转座子加入BAC中,最后采用Amaxa Nucleofector核转染技术将修饰过的BAC转入绒山羊成纤维细胞。结果表明成功构建了含有目的基因的BAC-Tol2载体。载体上包含UBC启动元件的egfp标记基因和真核筛选抗性neo基因,并且载体的两端加有loxp元件,为转染细胞后标记和抗性基因的去除作准备。载体转染细胞效率达到1%-6%,最高可达10%。成功获得了外源整合kap6.3、kap8.1和bmp4基因的细胞株,为以后克隆绒山羊作准备。研究表明,在BAC的修饰中应用Tol2转座子系统增加了电转染后的整合率,提高了BAC无错重组的效率和精确性。
|
| 关 键 词： | 绒山羊，细菌人工染色体 (BAC)，Tol2转座子，电转染 |
| 收稿时间： | 2015/6/24 0:00:00 |
Cashmere goat bacterial artificial chromosome recombination and cell transfection system |
| |
| Tian Huang,Zhongyang Cao,Yaohui Yang and Gengsheng Cao.Cashmere goat bacterial artificial chromosome recombination and cell transfection system[J].Chinese Journal of Biotechnology,2016,32(3):317-328. |
| |
| Authors: | Tian Huang Zhongyang Cao Yaohui Yang and Gengsheng Cao |
| |
| Institution: | 1 College of Life Sciences, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China; 2 Institute of Bioengineering, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China,1 College of Life Sciences, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China; 2 Institute of Bioengineering, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China,1 College of Life Sciences, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China; 2 Institute of Bioengineering, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China and 1 College of Life Sciences, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China; 2 Institute of Bioengineering, Henan University, Kaifeng 475004, Henan, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Cashmere goat bacterial artificial chromosome Tol2 transposon electric transfection |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物工程学报》下载免费的PDF全文 |
|
