| 谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 韦俊宏,张集慧,江玲娟,谭华荣,牛国清. 谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD的功能研究北大核心CSCD[J]. 微生物学报, 2016, 56(3): 406-417 |
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| 作者姓名： | 韦俊宏 张集慧 江玲娟 谭华荣 牛国清 |
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| 作者单位： | 西南大学, 家蚕基因组生物学国家重点实验室, 重庆 400715;中国科学院微生物研究所, 微生物资源前期开发国家重点实验室, 北京 100101,中国科学院微生物研究所, 微生物资源前期开发国家重点实验室, 北京 100101,中国科学院微生物研究所, 微生物资源前期开发国家重点实验室, 北京 100101,中国科学院微生物研究所, 微生物资源前期开发国家重点实验室, 北京 100101,中国科学院微生物研究所, 微生物资源前期开发国家重点实验室, 北京 100101 |
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| 基金项目： | 国家“973计划”(2015CB150600);国家自然科学基金(31270110,31571281) |
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| 摘 要： | 【目的】由于谷氏菌素产生菌禾粟链霉菌的遗传操作效率较低,本研究在谷氏菌素生物合成基因簇成功异源表达的基础上,通过在异源宿主天蓝色链霉菌M1146中阻断谷氏菌素生物合成基因gouC和gouD,研究其在谷氏菌素生物合成中的作用,为谷氏菌素生物合成途径的阐明奠定基础。【方法】以含有谷氏菌素生物合成基因簇的黏粒D6-4H为基础,通过PCR-targeting的方法分别将gouC和gouD敲除得到重组质粒p GOUe-ΔC和p GOUe-ΔD。通过接合转移将这两个重组质粒分别导入天蓝色链霉菌M1146中,获得gouC和gouD的缺失突变株M1146-GOUe-ΔC和M1146-GOUe-ΔD,通过HPLC分析突变株的谷氏菌素中间产物积累情况,分离纯化后对其进行结构鉴定和生物活性检测。【结果】gouC和gouD的缺失均导致谷氏菌素不能合成,突变株发酵液中积累了不同的中间产物,生物活性分析发现这些中间产物均失去了对肿瘤细胞的抑制活性。【结论】gouC和gouD是谷氏菌素生物合成的重要基因,与谷氏菌素肽基部分的肌氨酸残基合成相关。本研究为阐明谷氏菌素的生物合成机制提供了更多的依据。
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| 关 键 词： | 禾粟链霉菌 谷氏菌素 生物合成基因簇 功能研究 产物鉴定 |
| 收稿时间： | 2016-01-08 |
| 修稿时间： | 2016-01-29 |
Functional characterization of gouC and gouD in gougerotin biosynthesis |
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| Junhong Wei,Jihui Zhang,Lingjuan Jiang,Huarong Tan and Guoqing Niu. Functional characterization of gouC and gouD in gougerotin biosynthesis[J]. Acta microbiologica Sinica, 2016, 56(3): 406-417 |
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| Authors: | Junhong Wei Jihui Zhang Lingjuan Jiang Huarong Tan Guoqing Niu |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China;State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China,State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China and State Key Laboratory of Microbial Resources, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Streptomyces graminearus gougerotin gene cluster functional characterization compound identification |
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