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骨桥蛋白RNA干扰对人U251胶质瘤细胞在裸鼠体内生长的影响
引用本文:晋雯,李赞,黄智勇,高美钦. 骨桥蛋白RNA干扰对人U251胶质瘤细胞在裸鼠体内生长的影响[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2011, 27(6): 574-581
作者姓名:晋雯  李赞  黄智勇  高美钦
作者单位:福建医科大学病理学系;福建医科大学神经生物中心;福建医科大学肿瘤研究室;
基金项目:福建医科大学神经生物学基金(No.0160003)资助~~
摘    要:研究下调骨桥蛋白(osteopontin,OPN)对人U251胶质瘤细胞在裸鼠体内生长的影响并探讨其对胶质瘤生长、侵袭的可能机制.应用RNA干扰技术,将OPN基因的慢病毒干扰载体LV-OPNshRNA感染U251细胞.将对照和试验组U251细胞分别接种裸鼠,建立裸鼠荷瘤模型.3周后测量肿瘤的体积、瘤重并做肿瘤组织病理切片分析;利用RT-PCR和免疫印迹法检测OPN、尿激酶型纤维蛋白酶原激活物(uPA)、基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)的mRNA和蛋白表达;免疫组化法检测肿瘤组织微血管密度和血管内皮生长因子(VEGF)表达情况. 经OPN的RNA干扰后,能显著降低肿瘤组织OPN mRNA水平及蛋白表达,有效抑制肿瘤细胞生长及侵袭能力, 肿瘤体积及重量的减小有统计学意义(P<0.05).感染组uPA、MMP-2和MMP-9的mRNA和蛋白表达明显减少, 肿瘤组织的MVD值和VEGF的表达均显著降低.上述结果表明,抑制OPN的表达能明显抑制人U251胶质瘤细胞在裸鼠体内的生长和侵袭,OPN可能通过激活uPA、MMP-2和MMP-9等蛋白酶降解细胞外基质和促进肿瘤血管生成,参与胶质瘤的生长.

关 键 词:慢病毒载体  骨桥蛋白  RNA干扰   胶质瘤   裸鼠  
收稿时间:2010-12-20

Effect of Osteopontin Silencing by Lentivirus-mediated Delivery of RNA Interference on the Growth of U251 Cells in vivo
JIN Wen),),LI Zan),),HUANG Zhi-Yong),GAO Mei-Qin),). Effect of Osteopontin Silencing by Lentivirus-mediated Delivery of RNA Interference on the Growth of U251 Cells in vivo[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2011, 27(6): 574-581
Authors:JIN Wen)  )  LI Zan)  )  HUANG Zhi-Yong)  GAO Mei-Qin)  )
Affiliation:JIN Wen1),3),LI Zan1),2),HUANG Zhi-Yong1),GAO Mei-Qin1),2)(1)Department of Pathology,2)Institute of Oncology,3)Institute of Neurobiology,Fujian Medical University,Fuzhou 350001,China)
Abstract:To observe the effect of osteopontin(OPN) silencing on the growth of human glioma U251 cells of nude mice in vivo and to investigate the mechanism of OPN gene on the proliferation and invasion of glioma U251 cell.LV-N-OPN/U251 cells transfected with blank lentivirus vector,LV-OPNshRNA/U251cells transfected with shRNA lentivirus vector osteopontin,and untransfected U251 cells were injected into the oxter of the nude mice,respectively to establish the xenograft.The excised tumor masses on the 21st day,the vol...
Keywords:lentivirus vectors  osteopontin  RNA interference  glioma  nude mice  
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