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重组人源性抗HBsAg Fab抗体纯化方法的比较研究
引用本文:邓宁, 向军俭, 饶桂荣, 陈文吟,. 重组人源性抗HBsAg Fab抗体纯化方法的比较研究[J]. 生物工程学报, 2004, 20(6): 884-889
作者姓名:邓宁   向军俭   饶桂荣   陈文吟  
作者单位:1. 暨南大学生命科学技术学院分子免疫学与抗体工程实验室,广州,510632
2. 人民解放军第458医院全军传染病研究中心,广州,510601
基金项目:广州市科技局重点项目 (No .2 0 0 3J1 C0 171),国家自然科学基金项目 (No .40 3 760 3 0 )~~
摘    要:抗HBsAg Fab抗体被认为在预防和治疗HBV引起的肝病中具有重要的作用。为了建立稳定的、适于生产应用的重组人源性抗HBsAg Fab抗体的纯化工艺,本实验对不同纯化方法进行了比较研究。比较了抗Fab抗体亲和层析、ScFv单克隆抗体亲和层析和离子交换层析等3套纯化工艺在酵母发酵生产的重组人源性抗HBsAg Fab抗体纯化中的效率。结果显示,抗Fab抗体亲和层析柱纯化酵母表达的重组Fab,纯度为96.8%,但回收率偏低,只有30%~40%。ScFv单克隆抗体亲和层析纯化的重组Fab,纯度为97.5%,回收率达75%~85%。该工艺能很好的适应较小规模的生产应用。离子交换层析纯化的重组Fab,纯度为97%,回收率为75%~85%。该工艺能很好的适应较大规模的生产应用。以上结果表明,应用ScFv单克隆抗体亲和层析和离子交换层析纯化技术均能很好的纯化出重组人源性抗HBsAg Fab抗体,这两种纯化工艺不仅大大节约纯化成本,且纯化效率和回收率有很大提高。为莺组Fab抗体的工业化生产应用奠定了基础。

关 键 词:HBsAg  重组Fab  纯化方法  毕赤酵母
文章编号:1000-3061(2004)06-0884-06
修稿时间:2004-04-27

Study on the Methods of Purification of Recombinant Humanized anti-HBsAg Fab Antibody
DENG Ning XIANG Jun_Jian+ RAO Gui_Rong+ CHEN Wen_Yin+. Study on the Methods of Purification of Recombinant Humanized anti-HBsAg Fab Antibody[J]. Chinese journal of biotechnology, 2004, 20(6): 884-889
Authors:DENG Ning XIANG Jun_Jian+ RAO Gui_Rong+ CHEN Wen_Yin+
Affiliation:DENG Ning 1 XIANG Jun_Jian+ 1* RAO Gui_Rong+2 CHEN Wen_Yin+2 1
Abstract:
Keywords:HBsAg  recombinant Fab  methods of purification  Pichia pastoris
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