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TNF-α转化酶酵母双杂交系统"诱饵"质粒的构建及鉴定
作者姓名:刘鑫  于洪伟  王凤丹  王建醒  王淑娟  于晓光
作者单位:哈尔滨医科大学基础医学学院,生物化学与分子生物学教研室,黑龙江,哈尔滨,150081
基金项目:黑龙江省卫生厅科研项目
摘    要:目的:构建酵母双杂交系统“诱饵”质粒载体pGBKT7-TACE,并检测其是否具有自身激活及毒性作用。方法:从小鼠肝组织提取总RNA,用RT-PCR的方法获得TACE,克隆于pGBKT7载体上,酶切鉴定及序列分析,并检测pGBKT7-TACE在MATH-MAKER GAL4 Two-Hybrid System 3中的自激活和毒性作用。结果:本实验成功构建了“诱饵”质粒载体pGBKT7-TACE,并证明其在酵母双杂交系统中无自激活及毒性作用。结论:构建的诱饵质粒pGBKT7-TACE可应用在酵母双杂交系统中,为筛选小鼠cDNA文库中与TACE相互作用的蛋白奠定实验基础。

关 键 词:TNF-α转化酶  酵母双杂交系统  自激活作用  转化酶  酵母双杂交系统  实验基础  蛋白  相互作用  文库  小鼠  筛选  应用  诱饵质粒  质粒载体  结果  自激活  System  序列分析  酶切鉴定  克隆  TACE  组织提取  鼠肝
文章编号:1000-6834(2008)02-144-03
修稿时间:2006-07-21
本文献已被 维普 万方数据 等数据库收录!
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