嵌合鞭毛蛋白在大肠杆菌BL21(DE3) 和沙门菌SL5928中的表达与组装分析 |
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引用本文: | 胡茂志,潘志明,杨芸,孟闯,张磊,耿士忠,焦新安. 嵌合鞭毛蛋白在大肠杆菌BL21(DE3) 和沙门菌SL5928中的表达与组装分析[J]. 生物工程学报, 2017, 33(8): 1335-1342 |
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作者姓名: | 胡茂志 潘志明 杨芸 孟闯 张磊 耿士忠 焦新安 |
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作者单位: | 1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009; 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009,1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009; 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009,1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009; 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009,1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009; 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009,1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009; 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009,1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009; 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009,1 扬州大学 江苏省高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏 扬州 225009; 2 扬州大学 江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏 扬州 225009 |
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基金项目: | 国家自然科学基金 (Nos. 31320103907, 31372414 ),江苏省优势学科资助。 |
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摘 要: | 鞭毛蛋白根据能否组装可以表达为单体或多聚体。目前,关于它们之间的区别少有报道。文中,将重组质粒pET-fliC/M2e2分别导入大肠杆菌BL21(DE3) 和沙门菌SL5928中来表达嵌合鞭毛蛋白mfliC/M和pfliC/M,然后分析它们的组装特性。SDS-PAGE结果表明,两重组菌成功表达了嵌合鞭毛蛋白。透射电镜观察显示,在重组大肠杆菌表面未见鞭毛,而重组沙门菌表面呈现鞭毛。将嵌合蛋白纯化后,圆二色谱 (Circular dichroism,CD) 分析表明,两者的CD信号明显不同,pfliC/M的CD信号与野生型鞭毛蛋白一致,而mfliC/M基本上没有CD信号出现。动态光散射分析表明,mfliC/M的聚集程度明显低于pfliC/M。将嵌合蛋白转染小鼠腹腔细胞3 h后,两者均能诱导产生IL-1β,但mfliC/M组高于pfliC/M组。以上结果对于鞭毛蛋白表达形式的选择具有重要的参考价值。
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关 键 词: | 鞭毛蛋白,表达,组装,白细胞介素1β |
收稿时间: | 2016-10-03 |
Expression and assembly of chimeric flagellins in Escherichia coli BL21(DE3) and Salmonella SL5928 |
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Affiliation: | 1 Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China; 2 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China,1 Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China; 2 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China,1 Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China; 2 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China,1 Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China; 2 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China,1 Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China; 2 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China,1 Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China; 2 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China and 1 Jiangsu Co-innovation Center for Prevention and Control of Important Animal Infectious Diseases and Zoonoses, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China; 2 Jiangsu Key Laboratory of Zoonosis, Yangzhou University, Yangzhou 225009, Jiangsu, China |
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