阿霉素诱导足细胞凋亡模型的研究北大核心 |
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引用本文: | 张蓓,杨祎琦,张乐宁,韩晓东,田瑞敏,徐鹏,刘博.阿霉素诱导足细胞凋亡模型的研究北大核心[J].生物技术,2017(6):580-585. |
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作者姓名: | 张蓓 杨祎琦 张乐宁 韩晓东 田瑞敏 徐鹏 刘博 |
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作者单位: | 1.广州中医院大学第二临床医学院广东省中医药科学院510006;2.吉林大学中日联谊医院胸外科130033; |
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基金项目: | 国家自然科学基金项目(No.81202398;No.81574008);广东省科技计划项目(No.2014A020221035;No.2014A030313400;No.2015A030310490;No.2015A020211025;No.2015B020211013);广东省中医院中医药科学技术研究专项(No.YN2014ZHR209;No.YN2015MS03);国家中医药管理局临床基地科研专项(No.JDZX2015207);广东省高水平大学建设项目(No.A1-AFD018171Z11097) |
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摘 要: | 目的]建立由阿霉素(Adriamycin,ADM)诱导的足细胞凋亡模型,深入了解不同浓度阿霉素对足细胞凋亡及相关蛋白的影响,为进一步研究肾病综合征及相关抗足细胞凋亡药物的作用机制奠定实验基础。方法]采用温度敏感型足细胞在33℃完全培养基中(含IFN-γ)进行增殖培养,在37℃完全培养基中(不含IFN-γ)诱导培养14 d后形成终末分化足细胞;采用MTT法检测不同浓度ADM(0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.8、0.9μg/mL)在24 h时对足细胞活性的影响;采用流式细胞术检测不同浓度ADM对足细胞凋亡的影响;采用Western Blot法检测P53、Bcl-2/Bax、Caspase-3和Podocin相关蛋白的表达情况。结果]阿霉素在0.2~0.3μg/mL时即可显著影响足细胞活力(p<0.05),且相关蛋白表达有显著变化(p<0.05)。结论]0.2~0.3μg/mL范围内的阿霉素即可有效诱导足细胞凋亡,为后期建立阿霉素肾病的细胞模型提供实验基础。
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关 键 词: | 足细胞 阿霉素 肾病综合征 凋亡 |
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