| 小鼠IL-39的克隆及真核表达载体的构建北大核心 |
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| 引用本文： | 刘超波孙俊潘秀和蒋雯雯李燕李明才.小鼠IL-39的克隆及真核表达载体的构建北大核心[J].生物技术,2017(4):307-311. |
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| 作者姓名： | 刘超波孙俊潘秀和蒋雯雯李燕李明才 |
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| 作者单位： | 1.宁波大学医学院免疫学研究室315211; |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金项目("IL-37调控DC/Treg细胞诱导免疫耐受在支气管哮喘中的作用及分子机制"；No.LY17H010001)；浙江省公益技术应用研究项目("IL-38转基因小鼠的建立及在高脂饮食诱导肥胖小鼠模型中的作用"；No.2016C37139)；宁波市自然科学基金项目("IL-37抑制博来霉素诱导的小鼠肺纤维化的作用及机制"；No.2016A610088) |
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| 摘 要： | 目的]构建小鼠白介素(interleukin,IL)-39单链融合基因及其真核表达载体。方法]通过RT-PCR得到小鼠EB病毒诱导基因3(Epstein-Barr virus-induced gene 3,EBI3)及IL-23p19基因的全长编码区。通过重叠延伸PCR和编码疏水性多肽接头(linker)(Gly4Ser)3的DNA序列将小鼠EBI3全长编码区及IL-23p19成熟肽编码区连接起来,构建小鼠IL-39单链融合基因,并将其克隆至真核表达载体pc DNA3.1/V5-His中,通过限制性内切酶双酶切及基因测序鉴定阳性重组载体。结果]通过重叠延伸PCR得到1 254 bp大小的目的条带,测序分析显示,小鼠IL-39单链融合基因中EBI3、linker和IL-23p19的基因序列及连接顺序和方向均完全正确。结论]成功构建了小鼠IL-39单链融合基因及其真核表达载体。
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| 关 键 词： | 小鼠白介素-39 重叠延伸PCR 单链融合基因 真核表达载体 |
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