| 表达短lef-1 dsRNA的转化细胞对家蚕核型多角体病毒的抗性 |
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| 引用本文： | 鲁银松,薛仁宇,曹广力,张鹏杰,刘 波,贡成良.表达短lef-1 dsRNA的转化细胞对家蚕核型多角体病毒的抗性[J].生物化学与生物物理进展,2009,36(10):1356-1363. |
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| 作者姓名： | 鲁银松 薛仁宇 曹广力 张鹏杰 刘 波 贡成良 |
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| 作者单位： | 苏州人学基础医学与生物科学学院,苏州,215123 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(30571404)，江苏省教育厅自然科学基金(05KJD230181)，苏州市人才项目基金(2005-03)和国家重点基础研究发展计划(973)(2005CB121000)资助项目 |
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| 摘 要： | 为了探讨RNAi抑制家蚕核型多角体病毒(BmNPV)增殖的效果，用带有lef-1 dsRNA表达盒的转基因载体pigA3-LEF- Neo转染家蚕BmN培养细胞，通过G418(750～800 mg/L)筛选，获得了稳定转化细胞系．病毒感染试验显示，稳定转化细胞的病毒感染率比正常细胞低53%、转化细胞形成的多角体数量为普通细胞中的2/3、细胞培养上清中的游离病毒减少了90%以上，表明病毒在转化细胞中的增殖受到明显抑制；半定量RT-PCR结果显示，转化细胞中病毒lef-1的转录水平仅为正常细胞的2/5～3/5，表明转化细胞表达的lef-1 dsRNA抑制了病毒lef-1基因的表达．通过反向PCR分析外源DNA片段插入基因组位点，结果表明，在转化细胞中外源DNA可通过随机整合或按照piggyBac特定的转座位点TTAA插入细胞基因组．
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| 关 键 词： | RNA干扰，家蚕核型多角体病毒，培养细胞，piggyBac转座子 |
| 收稿时间： | 2009/1/19 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2009/8/27 0:00:00 |
Resistance to BmNPV of Transformation Cells Expressing Short lef-1 dsRNA |
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| LU Yin-Song,XUE Ren-Yu,CAO Guang-Li,ZHANG Peng-Jie,LIU Bo and GONG Cheng-Liang.Resistance to BmNPV of Transformation Cells Expressing Short lef-1 dsRNA[J].Progress In Biochemistry and Biophysics,2009,36(10):1356-1363. |
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| Authors: | LU Yin-Song XUE Ren-Yu CAO Guang-Li ZHANG Peng-Jie LIU Bo and GONG Cheng-Liang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | RNA interference BmNPV cell culture piggyBac transposition |
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