| siRNA介导Sry基因沉默对小鼠胚胎性别决定基因表达的影响 |
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| 引用本文： | 吴宁,林秀坤,廖冰,杜卫华,韩凤桐,赵金红. siRNA介导Sry基因沉默对小鼠胚胎性别决定基因表达的影响[J]. 遗传, 2008, 30(2): 195-202. DOI: 10.3724/SP.J.1005.2008.00195 |
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| 作者姓名： | 吴宁 林秀坤 廖冰 杜卫华 韩凤桐 赵金红 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100094;2. 东北农业大学, 哈尔滨 150030;3. 重庆畜牧科学院, 重庆 402460 ; |
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| 摘 要： | 为研究Sry基因的调控网络, 采用siRNA表达载体介导的RNAi技术, 特异性地抑制睾丸决定因子Sry在小鼠胚胎中的表达, 并观察Sry基因沉默后对在两性性腺分化中起重要作用的Wt1, Sf1, Dax1, Gata4, Sox9及Amh基因表达的影响。利用本课题组先前构建的siRNA重组表达载体(pSilencer4.1/Sry217及pSilencer4.1/Sry565), 通过尾静脉注射法导入妊娠9.5天(9.5 dpc)的母鼠体内, 在11.5 dpc时取胚胎, 对性别鉴定为雄性的胚胎以RT-PCR法和Western-blot检测Sry基因的表达抑制效果, 并同时用定量PCR法检测Wt1等上述性别决定相关基因表达变化情况。结果表明, 注射干扰质粒后48 h Sry基因的mRNA和蛋白表达水平均降低, 其中siRNA表达质粒pSilencer 4.1/Sry 565的抑制效果显著, 可达到80%的抑制率。Sry基因沉默后, Wt1基因表达量显著升高; Sf1, Dax1, Gata4, Sox9基因表达水平没有明显变化; Amh基因无表达。试验结果表明, Sry基因表达抑制会导致Wt1基因表达升高; 另外, Sry基因激活Sox9基因的表达可能需要其他的辅助因子协同作用。
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| 关 键 词： | 基因沉默 尾静脉注射 性别决定基因 siRNA Sry |
| 收稿时间： | 2007-09-03 |
| 修稿时间： | 2007-09-03 |
Effect of Sry silencing by siRNA on the expression of sex determining genes in mouse embryos |
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| WU Ning,LIN Xiu-Kun,LIAO Bing,DU Wei-Hua,HAN Feng-Tong,ZHAO Jin-Hong. Effect of Sry silencing by siRNA on the expression of sex determining genes in mouse embryos[J]. Hereditas, 2008, 30(2): 195-202. DOI: 10.3724/SP.J.1005.2008.00195 |
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| Authors: | WU Ning LIN Xiu-Kun LIAO Bing DU Wei-Hua HAN Feng-Tong ZHAO Jin-Hong |
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| Affiliation: | 1. Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100094, China; 2. Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China;3. Chongqing Academy of Animal Science, Chongqing 402460, China ; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sry siRNA |
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