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蒙古冰草磷脂酶D基因cDNA 3'端的克隆及分析
引用本文:康虹丽,韩冰,李淑芬.蒙古冰草磷脂酶D基因cDNA 3''端的克隆及分析[J].生物技术,2008,18(2):1-5.
作者姓名:康虹丽  韩冰  李淑芬
作者单位:内蒙古农业大学生物工程学院,内蒙古,呼和浩特,010018
基金项目:中国科学院"西部之光"人才培养计划
摘    要:目的:采用3’RACE方法对蒙古冰草磷脂酶D(PLD)基因3’端全序列进行了快速扩增和序列分析,为得到全序列及研究该基因的功能奠定基础。方法:实验以蒙古冰草幼叶为材料,利用RT-PCR技术得到PLD基因的部分cDNA序列,根据此序列设计一条特异性上游引物,反转录引物中的部分序列即M13PrimerM4作为下游引物,按3’RACE试剂盒(TaKaRa)操作流程进行PLD基因3’末端的快速扩增,成功获得993bp的3’RACE反应产物,采用DNAStar软件对扩增的PLD基因的3’RACE产物和中间片段进行拼接,最终获得2113bp的PLD基因3’端cDNA序列。结果:通过BLAST技术,发现该片段与许多植物磷脂酶D基因的同源性为47.0%~80.0%。结论:通过同源性比较,成功克隆了PLD基因cDNA3’端序列。

关 键 词:磷脂酶D基因  3’RACE  cDNA
文章编号:1004-311X(2008)02-0001-05
修稿时间:2007年10月25

Cloning and Sequence Analysis of Phospholipase D Gene 3'End cDNA of Agropyron mongolicum Keng
KANG Hong-li,HAN Bing,LI Shu-fen.Cloning and Sequence Analysis of Phospholipase D Gene 3''''End cDNA of Agropyron mongolicum Keng[J].Biotechnology,2008,18(2):1-5.
Authors:KANG Hong-li  HAN Bing  LI Shu-fen
Abstract:
Keywords:
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