| mNUDC基因在巴斯德毕赤酵母中表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 陈彦球,魏明旭,张磊,杨燕.mNUDC基因在巴斯德毕赤酵母中表达载体的构建及表达[J].现代生物医学进展,2009,9(10). |
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| 作者姓名： | 陈彦球 魏明旭 张磊 杨燕 |
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| 作者单位： | 中山大学第一附属医院;中山大学教育部基因工程重点实验室;中山大学公共卫生学院; |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金博士肩动资助项目，教育部博士点基金新教师资助项目，中山大学实验室开放基金 |
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| 摘 要： | 目的:探索小鼠核迁移蛋白C(mNUDC)在毕赤酵母分泌表达的方法.方法:应用PCR扩增本实验室所构建的重组质粒PET28b-his-mNUDC中的mNUDC基因,使用基因重组方法构建毕赤酵母真核表达栽体pPICZaA-his-mNUDC,电击转化酵母茵株KM71后,经摇瓶发酵和甲醇诱导,SDS-PAGE和Westernblot分析鉴定上清中重组mNUDC蛋白表达量.结果:经过PCR方法,有效扩增了mNUDC基因,构建了pPICZα A-his-mNUDC酵母表达质粒,序列分析表明所构建的含mNUDC基因的质粒与设计相同,mNUDC蛋白得到正确表达.使用SDS-PAGE和Western blot方法可以检测到mNUDC的稳定、高效地分泌表达.结论:成功地构建了mNUDC基因的毕赤酵母表达载体pPICZα A-his-mNUDC,并在毕赤酵母中实现分泌型离表达,为进一步研究mNUDC蛋白对小鼠的生物活性奠定了实验基础.
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| 关 键 词： | mNUDC 毕赤酵母 分泌表达 |
Construction and Expression of mNUDC Gene in the Pichia Pastoris |
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| CHEN Yan-qiu,WEI Ming-xu,ZHANG Lei,YANG Yan.Construction and Expression of mNUDC Gene in the Pichia Pastoris[J].Progress in Modern Biomedicine,2009,9(10). |
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| Authors: | CHEN Yan-qiu WEI Ming-xu ZHANG Lei YANG Yan |
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| Institution: | CHEN Yan-qiu1,WEI Ming-xu2,ZHANG Lei2,YANG Yan3 (1 First Affiliated Hospital,Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510080,China,2 The Key Laboratory of Gene Engineering of Education Ministry,Guangzhou 510275,3 Public Health School,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Pichia pastoris mNUDC Secretory expression |
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