| 绵羊Myostatin基因启动子的功能分析 |
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| 引用本文： | 杜荣,安晓荣,陈永福,秦健.绵羊Myostatin基因启动子的功能分析[J].中国科学C辑,2007,37(5):551-557. |
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| 作者姓名： | 杜荣 安晓荣 陈永福 秦健 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业大学生物学院,农业生物技术国家重点实验室,北京,100094;山西农业大学动物科技学院,太谷,030801
2. 中国农业大学生物学院,农业生物技术国家重点实验室,北京,100094
3. 山西农业大学现代教育技术学院,太谷,030801 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 相比于Myostatin基因的作用机制而言, 对Myostatin基因转录和表达的调控机制了解很少. 为了更好地了解Myostatin基因5’调控区的结构和功能, 深入研究Myostatin基因的转录调控机制, 在最近的研究中克隆了绵羊Myostatin基因的启动子(Pro)序列(GenBank 登录号为AY918121). 进一步以EGFP为报告基因, 构建了各种长度的野生型MSTNProW-EGFP载体和E-box元件突变型MSTNProEM-EGFP载体, 通过转染C2C12小鼠骨骼肌成肌细胞系或绵羊成纤维细胞后, 对各种情况下EGFP的瞬时或稳定表达进行荧光定量分析而比较不同条件下绵羊Myostatin基因启动子的转录调控活性. 结果表明, 0.3~1.2 kb的绵羊Myostatin基因启动子都能不同程度地驱动EGFP在C2C12细胞中的转录和表达, 其中1.2 kb片段的转录调控活性最高. 然 而, 将绵羊1.2 kb MSTNProW-EGFP载体转染绵羊成纤维细胞后并未观察到EGFP的表达, 说明Myostatin基因表达的肌肉特异性源于启动子的转录特异性. 对稳定转染绵羊1.2 kb MSTNProW-EGFP载体的C2C12细胞进行荧光分析, 结果表明细胞生长密度的增加可以反馈性抑制Myostatin基因的转录和表达. 在C2C12分化状态下, 1.2 kb野生型绵羊Myostatin基因启动子的活性比成肌状态时显著升高, 而1.2 kb E(3+5+7)突变型Myostatin基因启动子的活性在C2C12分化前后并未表现出差别. 这一结果暗示肌肉调控因子MyoD可能是通过与E-box结合而引起Myostatin基因在C2C12分化和生长状态时转录和表达差异的一个原因.
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| 关 键 词： | aries) Myostatin基因启动子 转录调控活性 C2C12 绵羊(Ovis |
| 收稿时间： | 2006-10-31 |
| 修稿时间： | 2006年10月31 |
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