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生物发光法微生物快速检测试剂的性质及其影响因素研究
引用本文:张菊梅,吴清平,李程思,吴慧清.生物发光法微生物快速检测试剂的性质及其影响因素研究[J].微生物学通报,2006,33(3):36-41.
作者姓名:张菊梅  吴清平  李程思  吴慧清
作者单位:1. 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室,广州,510070;中国科学院南海海洋研究所,广州,510301;中国科学院研究生院,北京,100049
2. 广东省微生物研究所广东省菌种保藏与应用重点实验室,广州,510070
基金项目:广东省科技攻关项目(No.2003B30902)
摘    要:研究了ATP生物发光微生物快速检测试剂的反应动力学、反应最适温度、pH以及各种影响因素。在ATP生物发光反应中,测试系统中D-荧光素用量为40~50μg/mL时对反应已经足够;发光脉冲计数CPM值随反应时间的延长不断降低,开始的1min内,其CPM值下降最快,然后下降速度不断减缓;反应的最适温度为24℃~25℃;而体系的最佳pH为7.2-7.4。配制好的发光试剂溶液置于4℃保存45h,可以保持86%的活力。在25℃时保温1h,活力下降较少,随时间的增加,活力逐渐下降,到6.5h时,仅剩53.5%的活力,而在33℃时,随着保温时间的延长,酶活力下降较快,保温1.5h,活力剩下59.1%,因此保存温度对发光试剂活力的影响非常大。各种化学物质如酸、碱、盐及表面活性剂都会抑制ATP发光反应,当NaCl浓度达到1.5g/L时,即可以抑制52.5%的发光,TritonX-100及酸、碱对系统均有一定的影响,CTAB、SDS及TCA则严重抑制发光反应。

关 键 词:生物发光  微生物  快速检测试剂  性质  影响因素
文章编号:0253-2654(2006)03-0036-06
收稿时间:2005-07-22
修稿时间:2005-10-21

Study on the Characteristics and Influential Factors of Microbial Rapid Detection Reagent by Bioluminescence
ZHANG Ju-Mei,WU Qing-Ping,LI Cheng-Si,WU Hui-Qing.Study on the Characteristics and Influential Factors of Microbial Rapid Detection Reagent by Bioluminescence[J].Microbiology,2006,33(3):36-41.
Authors:ZHANG Ju-Mei  WU Qing-Ping  LI Cheng-Si  WU Hui-Qing
Institution:1. Guangdong Provincial Key Laboratory of Culture Collection and Application, Guangdong Institute of Microbiology, Guangzhou 510070;2. South China Sea Institute of Oceanology, Academia Sinica, Guangzhou 510301;3. Graduate University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049
Abstract:
Keywords:Bioluminescence  Microorganism  Rapid detection reagent  Characteristic  Influential factor
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