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猪表皮生长因子在植物乳杆菌中的表达及其活性检测
引用本文:钟泽民,赖强,余希尧,刘德辉,黄毓茂.猪表皮生长因子在植物乳杆菌中的表达及其活性检测[J].生物工程学报,2015,31(9):1325-1334.
作者姓名:钟泽民  赖强  余希尧  刘德辉  黄毓茂
作者单位:1 华南农业大学兽医学院,广东 广州 510642,1 华南农业大学兽医学院,广东 广州 510642,1 华南农业大学兽医学院,广东 广州 510642,2 广州沃德生物科技有限公司,广东 广州 510663,1 华南农业大学兽医学院,广东 广州 510642
摘    要:为获得一株高效表达猪表皮生长因子(p EGF)的重组植物乳杆菌,并检测其生物活性,从仔猪肠道内容物中分离植物乳杆菌,选择其中生物活性最强的一株(Lp-1)为宿主。以商品化乳杆菌表达载体p IAβ8为骨架,干酪乳杆菌超强组成型启动子SCP、M6前体蛋白信号肽SP、猪表皮生长因子p EGF等为元件,构建表达p EGF的植物乳杆菌重组表达载体p SCPSE。用电转化方法 (2.0 k V,2 000?,25μF,4.0 ms)将重组载体p SCPSE转化入宿主菌Lp-1中获得重组植物乳杆菌Lp-p SCPSE。以Tricine-SDS-PAGE法和p EGF ELISA特异性检测试剂盒检测目的蛋白的表达;用培养12 h的阳性转化子菌体给刚断奶的BALB/c小鼠灌胃,2次/d,连续10 d,以断奶小鼠的体重、肠绒毛长度和隐窝深度的变化为指标,检测目的蛋白的生物活性。Tricine-SDS-PAGE检测和小鼠实验结果显示,重组植物乳杆菌的培养上清中出现6 k Da左右p EGF的特异性条带,且表达p EGF的重组植物乳杆菌能显著增加(P0.05)断奶小鼠的体重、肠绒毛高度和肠隐窝深度。结果表明,p EGF在植物乳杆菌中成功表达,且具有良好的生物学活性。

关 键 词:猪源乳酸杆菌,猪表皮生长因子  (pEGF),断奶小鼠,绒毛高度,隐窝深度
收稿时间:2014/11/11 0:00:00

Expression and characterization of porcine epidermal growth factor in Lactobacillus plantarum
Zemin Zhong,Qiang Lai,Xiyao Yu,Dehui Liu and Yumao Huang.Expression and characterization of porcine epidermal growth factor in Lactobacillus plantarum[J].Chinese Journal of Biotechnology,2015,31(9):1325-1334.
Authors:Zemin Zhong  Qiang Lai  Xiyao Yu  Dehui Liu and Yumao Huang
Institution:1 College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China,1 College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China,1 College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China,2 Guangzhou Well Biotechnology Co. LTD, Guangzhou 510663, Guangdong, China and 1 College of Veterinary Medicine, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China
Abstract:
Keywords:Lactobacillus planetarium  porcine epidermal growth factor (pEGF)  early-weaned mice  villus height  crypt depth
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