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基于荧光染料PicoGreen和核酸适配体的伏马毒素B1检测方法
引用本文:桂海娈,金庆日,张亚军,王晓杜,杨永春,邵春艳,程昌勇,卫芳芳,杨杨,杨梦华,宋厚辉.基于荧光染料PicoGreen和核酸适配体的伏马毒素B1检测方法[J].生物工程学报,2015,31(9):1393-1400.
作者姓名:桂海娈  金庆日  张亚军  王晓杜  杨永春  邵春艳  程昌勇  卫芳芳  杨杨  杨梦华  宋厚辉
作者单位:浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300,浙江农林大学动物科技学院,浙江 临安 311300
基金项目:国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2012AA101602),浙江省大学生科技创新活动计划 (新苗人才计划) (No. 2014R412040),浙江农林大学人才启动项目 (Nos. 2011FR025, 2013FR012, 2012FR047, 2013FR076, 2013FR054) 资助
摘    要:伏马毒素B1是主要存在于玉米及玉米制品中的一种可以引起癌症的霉菌毒素。针对霉菌毒素精准检测技术的开发对于保障食品安全至关重要。本研究利用核酸适配体与伏马毒素B1结合后不再结合其互补核酸序列的选择性以及Pico Green与双链DNA结合的特异性,开发了一种快速检测伏马毒素B1的适配体方法。Pico Green与双链DNA反应15 min后激发产生的荧光达到峰值(激发波长为480 nm,发射波长为520 nm)。该方法的最低检测限为0.1μg/L(0.1 ppb),线性范围为0.1-1μg/L(0.1-1 ppb),整个检测流程可在40 min内完成。特异性试验显示伏马毒素B1适配体与黄曲霉毒素B1、赭曲霉毒素、桔毒素和玉米赤霉烯酮等常见霉菌毒素无交叉反应。结果表明适配体方法与基于抗体的检测伏马毒素B1商品化ELISA试剂盒相当,Kappa值为0.857。由于核酸适配体比抗体成本低,检测时间短,因此基于核酸适配体的方法比基于抗体的ELISA方法更具有推广应用价值。

关 键 词:伏马毒素B1,核酸适配体,荧光染料,PicoGreen,检测
收稿时间:2014/11/30 0:00:00

Development of an aptamer/fluorescence dye PicoGreen-based method for detection of fumonisin B1
Hailuan Gui,Qingri Jin,Yajun Zhang,Xiaodu Wang,Yongchun Yang,Chunyan Shao,Changyong Cheng,Fangfang Wei,Yang Yang,Menghua Yang and Houhui Song.Development of an aptamer/fluorescence dye PicoGreen-based method for detection of fumonisin B1[J].Chinese Journal of Biotechnology,2015,31(9):1393-1400.
Authors:Hailuan Gui  Qingri Jin  Yajun Zhang  Xiaodu Wang  Yongchun Yang  Chunyan Shao  Changyong Cheng  Fangfang Wei  Yang Yang  Menghua Yang and Houhui Song
Abstract:
Keywords:fumonisin B1  aptamer  fluorescent dye  PicoGreen  detection
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