| H5亚型禽流感病毒单抗-生物素捕获ELISA的建立 |
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| 引用本文： | 王传彬,田新生,曹振,遇秀玲,孙明,陈西钊,王宏伟,田克恭.H5亚型禽流感病毒单抗-生物素捕获ELISA的建立[J].中国实验动物学报,2004,12(4):204-207. |
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| 作者姓名： | 王传彬 田新生 曹振 遇秀玲 孙明 陈西钊 王宏伟 田克恭 |
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| 作者单位： | 农业部兽医诊断中心,北京,100094 |
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| 基金项目： | 科技部高致病性禽流感防治攻关项目(02_02)，国家科技攻关计划项目(2004BA519A24)。 |
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| 摘 要： | 目的建立一种单克隆抗体介导的、经生物素—亲和素系统放大的H5亚型禽流感病毒捕获ELISA检测方法,为进一步研究检测试剂盒提供基础。方法用亲和层析法纯化抗禽流感病毒H5亚型血凝素单克隆抗体,包被微量反应板,用于捕获病毒抗原,再用生物素标记的单抗和酶标亲和素来检测病毒血凝素抗原,经方阵试验优化ELISA反应体系。用该方法检测H1—H15亚型AIV标准毒株和H5、H7、H9亚型AIV分离株,并与血凝和血凝抑制试验比较,评价其敏感性和特异性。结果纯化后的单抗具有良好的反应活性,生物素标记单抗工作浓度为1∶5000;ELISA对H5亚型AIV的检出限为025个血凝单位。该ELISA反应体系能检出H5N3标准株和所有20株国内H5亚型AIV分离株,而与其他14个血凝素亚型的AIV标准株、15个H9亚型AIV分离株和2个H7亚型AIV分离株均无交叉反应。结论初步建立了检测H5亚型禽流感病毒的单抗—生物素捕获ELISA方法,为研制试剂盒和进一步应用试验提供了基础。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 抗体 单克隆 酶联免疫吸附测定 |
| 文章编号： | 1005-4847(2004)04-0204-04 |
| 修稿时间： | 2004年10月9日 |
Establishment of H5 Avian Influenza Virus Capture ELISA Employing Biotin Labeled Monoclonal Antibody |
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| WANG Chuan_bin,TIAN Xin_sheng,CAO Zheng,YU Xiu_ling,SUN Ming,CHEN Xi_zhao,WANG Hong_wei,TIAN Ke_gong.Establishment of H5 Avian Influenza Virus Capture ELISA Employing Biotin Labeled Monoclonal Antibody[J].Acta Laboratorium Animalis Scientia Sinica,2004,12(4):204-207. |
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| Authors: | WANG Chuan_bin TIAN Xin_sheng CAO Zheng YU Xiu_ling SUN Ming CHEN Xi_zhao WANG Hong_wei TIAN Ke_gong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Avian Influenza Virus Antibody monoclonal Enzyme_linked Immunosorbent Assay |
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