| 细菌耐热植酸酶基因的克隆及表达* |
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| 引用本文： | 刘丽丽, 杨文博, 刘忠,. 细菌耐热植酸酶基因的克隆及表达*[J]. 微生物学通报, 2004, 31(4): 57-60 |
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| 作者姓名： | 刘丽丽 杨文博 刘忠 |
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| 作者单位： | 1. 天津师范大学化学与生命科学学院,天津,300071;南开大学生命科学学院,天津,300071;天津市农业生物技术研究中心,天津,300192
2. 南开大学生命科学学院,天津,300071 |
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| 基金项目： | 天津市科技攻关项目 (No 0 0 3 1 2 2 1 1 1 4)，天津市自然基金项目 (No 0 1 3 60 981 1 ) |
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| 摘 要： | 设计筛选培养基，从203株细菌菌株中筛选到四株可以分解植酸的菌株：SD01N，SD01X，SD01B和SD01D，设计植酸酶基因特异性引物P1和P2，分别以这四株菌的基因组DNA为模板进行扩增，其中菌株SD01N出现一条明显的扩增条带，大小约1．2kb。对PCR产物进行序列分析表明，该片段含有一个编码383个氨基酸的开放阅读框架。将该片段与载体pQE-30连接后转化大肠杆菌M15，得到重组菌株SDLiuTP01，对该菌株进行培养，经IPIG诱导基因表达，与携带空载体菌株相比较，在菌株SDLiuTP01中可检测到植酸酶活力。对重组菌株的植酸酶活力考察表明，该酶在25℃～95℃温度范围均具生物活性，最适反应温度为75℃，属于耐热性植酸酶。在各pH缓冲系统中反应结果，酶活力出现两个较高值，分别为pH4．6和pH7．5。
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| 关 键 词： | 耐热植酸酶 克隆 大肠杆菌 芽孢杆菌。 |
| 文章编号： | 0253-2654(2004)04-0057-04 |
| 修稿时间： | 2003-08-20 |
Clone and Expression of Thermostable Phytase Gene in Bacteria |
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| LIU Li Li ,, YANG Wen Bo LIU Zhong. Clone and Expression of Thermostable Phytase Gene in Bacteria[J]. Microbiology China, 2004, 31(4): 57-60 |
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| Authors: | LIU Li Li YANG Wen Bo LIU Zhong |
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| Affiliation: | LIU Li Li 1,2,3 YANG Wen Bo 2 LIU Zhong 2 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Thermostable phytase Clone E coli Bacillus sp |
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