用NAG酶活性荧光测定法检测3T3细胞增殖及其应用 |
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引用本文: | 丁焕文,何锡煌.用NAG酶活性荧光测定法检测3T3细胞增殖及其应用[J].细胞生物学杂志,1998,20(1):41-45. |
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作者姓名: | 丁焕文 何锡煌 |
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作者单位: | 广州军区广州总医院骨科,第三军医大学西南医院外科教研室,广州军区广州总医院骨科 510010,重庆,400038.,510010 |
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基金项目: | 全军95青年基金部分资助,课题编号96Q017 |
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摘 要: | 设计采用NAG酶活性荧光测定法检测3T3细胞增殖,本实验确立了检测3T3细胞NAG酶活性的一些实验条件,并将该方法用于bFGF的生物活性鉴定。结果:(1)3T3细胞数目在10~3-1.5×10~5之间与NAG酶活性成直线关系,且检测下限细胞数目低达10~3个细胞,表明该方法灵敏度高。(2)接种3T3细胞密度以10~3-1.5×10~3/孔(96孔培养板)为宜。(3)维持3T3细胞正常成活的最适血清浓度为0.4%—0.8%。(4)检测3T3细胞NAG酶活性以样品刺激培养48h为宜。(5)bFGF样品与标准品一样能促进3T3细胞增殖,但bFGF样品生物活性较bFGF标准品差。结论:NAG酶活性测定法能用来检测3T3细胞增殖,该方 法优于以往的细胞计数法、~3H—TdR参入法。
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关 键 词: | 4-甲基伞形酮-乙酰氨基葡萄糖苷 3T3 细胞 碱性成纤维细胞生长因子 |
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