| 苏云金芽胞杆菌CcpA蛋白对几丁质酶基因chiA和chiB的表达调控作用 |
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| 引用本文： | 潘锦华,姜昆,汪婷婷,陈月华,蔡峻. 苏云金芽胞杆菌CcpA蛋白对几丁质酶基因chiA和chiB的表达调控作用[J]. 微生物学通报, 2016, 43(3): 510-517 |
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| 作者姓名： | 潘锦华 姜昆 汪婷婷 陈月华 蔡峻 |
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| 作者单位： | 1. 南开大学生命科学学院 微生物系 天津 300071,1. 南开大学生命科学学院 微生物系 天津 300071,1. 南开大学生命科学学院 微生物系 天津 300071,1. 南开大学生命科学学院 微生物系 天津 300071;2. 分子微生物学与技术教育部重点实验室 天津 300071;3. 天津市微生物功能基因组学重点实验室 天津 300071,1. 南开大学生命科学学院 微生物系 天津 300071;2. 分子微生物学与技术教育部重点实验室 天津 300071;3. 天津市微生物功能基因组学重点实验室 天津 300071 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No. 31371979)；天津市自然科学基金项目(No. 15JCYBJC30200) |
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| 摘 要： | 【目的】研究苏云金芽胞杆菌Bti75中糖代谢蛋白Ccp A对两种几丁质酶基因chi A和chi B的表达调控。【方法】利用PREDetector软件分析Bti75 chi A和chi B的基因上游区序列,EMSA方法在体外验证Ccp A是否能与chi A和chi B基因的启动子区域片段特异性结合。构建ccp A基因敲除载体以获得敲除突变株Δccp A,运用实时荧光定量PCR技术和Western blot技术比较有无葡萄糖存在的情况下,Ccp A对chi A和chi B基因表达的影响。【结果】计算机分析显示,chi B上游启动子区存在一个潜在的Ccp A结合位点crechi B,而chi A上游启动子区未发现类似序列。体外实验表明,Ccp A蛋白在共阻遏蛋白Hpr-Ser45-P的参与下可与chi B基因启动子区特异性结合,而与chi A基因启动子区没有特异性结合;实时荧光定量PCR和Western blot结果均显示,Bti75中ccp A基因敲除后,同样在葡萄糖存在下chi B的表达量提高而chi A的表达量变化不明显。【结论】在葡萄糖存在的情况下,Ccp A蛋白能抑制苏云金芽胞杆菌中几丁质酶chi B的表达,而chi A的表达不受Ccp A调控。
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| 关 键 词： | 苏云金芽胞杆菌，CcpA蛋白，几丁质酶，表达调控 |
Regulation effect of CcpA on chitinase gene chiA and chiB in Bacillus thuringiensis |
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| PAN Jin-Hu,JIANG Kun,WANG Ting-Ting,CHEN Yue-Hua and CAI Jun. Regulation effect of CcpA on chitinase gene chiA and chiB in Bacillus thuringiensis[J]. Microbiology China, 2016, 43(3): 510-517 |
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| Authors: | PAN Jin-Hu JIANG Kun WANG Ting-Ting CHEN Yue-Hua CAI Jun |
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| Affiliation: | 1. Department of Microbiology, College of Life Sciences, Nankai University, Tianjin 300071, China,1. Department of Microbiology, College of Life Sciences, Nankai University, Tianjin 300071, China,1. Department of Microbiology, College of Life Sciences, Nankai University, Tianjin 300071, China,1. Department of Microbiology, College of Life Sciences, Nankai University, Tianjin 300071, China;2. Key Laboratory of Molecular Microbiology and Technology, Ministry of Education, Tianjin 300071, China;3. Tianjin Key Laboratory of Microbial Functional Genomics, Tianjin 300071, China and 1. Department of Microbiology, College of Life Sciences, Nankai University, Tianjin 300071, China;2. Key Laboratory of Molecular Microbiology and Technology, Ministry of Education, Tianjin 300071, China;3. Tianjin Key Laboratory of Microbial Functional Genomics, Tianjin 300071, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus thuringiensis CcpA chitinase expression regulation |
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