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采用单碱基突变模板作为内对照对组织中mRNA水平进行PCR定量
引用本文:陆利民,李海雁,江蓉,姚泰.采用单碱基突变模板作为内对照对组织中mRNA水平进行PCR定量[J].生理学报,1997,49(2):235-240.
作者姓名:陆利民  李海雁  江蓉  姚泰
基金项目:国家教育委员会博士点基金!1332104,美国纽约中华医学基金!90-527
摘    要:用PCR方法对原始模板进行单碱基突变,在原始模板DNA的特定位点引入一个EcoRI酶切位点。单碱基突变的DNA经PCR扩增后定量、稀释,作为内标加入到样品中与待测DNA同时进行PCR扩增.扩增产物经酶切后电泳,根据电泳结果中不同分子量DNA片段的含量,对样品中待测基因拷贝数进行定量分析。实验结果观察到:每1μg肝脏组织总RNA经逆转录后AVPV1受体cDNA拷贝数约1.25×10-20mol。

关 键 词:聚合酶链反应  定量PCR  基因突变  mRNA

QUANTITATIVE ANALYSIS OF mRNA LEVEL BY PCR METHOD USING SINGLE BASEMUTATED TEMPLATE AS INNER STANDARD
LU LI-MIN, LI HAI-YAN, WANG RONG,YAO TAI.QUANTITATIVE ANALYSIS OF mRNA LEVEL BY PCR METHOD USING SINGLE BASEMUTATED TEMPLATE AS INNER STANDARD[J].Acta Physiologica Sinica,1997,49(2):235-240.
Authors:LU LI-MIN  LI HAI-YAN  WANG RONG  YAO TAI
Abstract:
Keywords:quantitative PCR  genetic mutant  vasopressin V1 receptor
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