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戊型肝炎病毒基因片段开读框架3(369bp)的克隆载体及真核表达载体的构建
引用本文:李启明,沈心亮,蒋琳,张春江.戊型肝炎病毒基因片段开读框架3(369bp)的克隆载体及真核表达载体的构建[J].微生物学免疫学进展,2002,30(3):6-10.
作者姓名:李启明  沈心亮  蒋琳  张春江
作者单位:兰州生物制品研究所,兰州,730046
基金项目:甘肃省自然科学基金资助项目 (编号 :VS0 0 1 A2 3 0 65 Y)
摘    要:通过聚合酶链式反应(PCR)技术,以戊肝病毒cDNA为模板将开读框架3的基因片段扩增并克隆入载体pUC18中,再对扩增片段进行酶切鉴定及测序。结果表明此片段与膜板序列的同源性达到99%以上,将此片段克隆后通过一系列分子生物学技术装入真核胞内表达载体PPIC3及分泌性载体PPIC9中,并对载体进行酶切鉴定证实外源基因插入的正确性,最终完成表达载体的构建。

关 键 词:戊型肝炎病毒  基因片段  开读框架3  克隆载体  真核表达载体  构建
文章编号:1005-5673(2002)-03-0006-05

Construction of clone and expression vector of HEV(ORF3) gene
LI Qi ming,SHEN Xin liang,JIANG Lin,et al..Construction of clone and expression vector of HEV(ORF3) gene[J].Progress In Microbiology and Immunology,2002,30(3):6-10.
Authors:LI Qi ming  SHEN Xin liang  JIANG Lin  
Abstract:The open read frame 3(ORF3) of the hepatitis E virus was amplified by PCR with the cDNA template.The PCR products were sequenced after cloning into the pUC18 clone vector.The results shows that the homoligy between the ORF3 segment in pUC18 and PCR template was 99.8% at the nucleic acid level.Finally,The ORF3 segment in pUC18 was inserted into PPIC3 and PPIC9 expression vectors of Pichia pastoris yeast.
Keywords:HEV virus  ORF3(Open read frame)  Clone vector  Expression vectors  
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