西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因启动子区的克隆、生物信息学分析及活性研究 |
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引用本文: | 梁克明,朱婧,童德文,陈南春,陈苏民.西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因启动子区的克隆、生物信息学分析及活性研究[J].生物技术通讯,2005,16(4):363-366. |
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作者姓名: | 梁克明 朱婧 童德文 陈南春 陈苏民 |
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作者单位: | 1. 第四军医大学,基础部生物化学与分子生物学教研室,陕西,西安,710032 2. 西北农林科技大学,动物科技学院,陕西,杨凌,712100 |
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摘 要: | 根据已发表的β-酪蛋白基因全序列设计合成引物,以西农萨能奶山羊乳腺组织基因组DNA为模板,通过长链PCR扩增β酪蛋白基因组基因5’侧序列。将该序列克隆入pMD18-T载体,并对其进行序列测定。结果克隆得到西农萨能奶山羊β-酪蛋白基因-4 359至+2 106共6465bp序列。该序列保留β-酪蛋白第一内含子、第一外显子和第二外显子及其信号肽部分。将该序列与已公布的其他山羊β-酪蛋白基因序列进行比较,其同源性为96%-98%。生物信息学分析显示,β-酪蛋白基因启动子区包含有TATA启动子序列和HOXF、Oct-1、AP1、CEBP、STAT、NFKB、GR、ER、PR和ETS等转录因子识别位点。将此6 465bp片段插入荧光素酶报道基因载体pGL3-Basic中,构建重组质粒pGL3/B65,瞬时转染萨能奶山羊原代培养的乳腺上皮细胞48h后检测显示,该假设的启动子区确有启动子功能,对泌乳激素发生反应。本研究为进一步构建有效的乳腺生物反应器载体奠定了基础。
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关 键 词: | β-酪蛋白基因 西农萨能奶山羊 启动子区域 转录调控 |
文章编号: | 1009-0002(2005)04-0363-04 |
收稿时间: | 02 18 2005 12:00AM |
修稿时间: | 2005年2月18日 |
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