| 氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II的表达纯化及初步活性 |
| |
| 引用本文： | 王震,陈云波,查长森,邹立林,彭颖,季敬璋,陈秀枢,吕建新. 氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II的表达纯化及初步活性[J]. 细胞生物学杂志, 2007, 0(1) |
| |
| 作者姓名： | 王震 陈云波 查长森 邹立林 彭颖 季敬璋 陈秀枢 吕建新 |
| |
| 作者单位： | 温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室，温州医学院微生态学研究所，温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室 温州，325035温州医学院细胞与分子医学研究所，温州，325035，温州，325035温州医学院细胞与分子医学研究所，温州，325035，温州，325035温州医学院细胞与分子医学研究所，温州，325035，温州，325035温州医学院细胞与分子医学研究所，温州，325035，温州，325035温州医学院细胞与分子医学研究所，温州，325035，温州，325035温州医学院细胞与分子医学研究所，温州，325035，温州325035，温州，325035温州医学院细胞与分子医学研究所，温州，325035 |
| |
| 基金项目： | 浙江省科技厅重点项目(No.2004C23018)~~ |
| |
| 摘 要： | 用PCR扩增的氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶II[aac(3)-II]基因构建了能表达较高活性AAC(3)-II的重组工程菌,并获取重组AAC(3)-II。含pET28a质粒的工程菌转入aac(3)-II基因前后对氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度进行比较,重组菌超声裂解上清液及其纯化的AAC(3)-II进行SDS-PAGE和Western印迹电泳鉴定。最低抑菌浓度表明转入aac(3)-II基因的工程菌比未转入的工程菌对庆大霉素(gentamicin,GEN)的提高了256倍,对妥布霉素(tobramycin,TOB)及其奈替米星(netilmicin,NTL)提高了16倍,电泳鉴定表明纯化获取的是重组AAC(3)-II,其相对分子质量约为32kDa,纯度大于95%,纯化后的10μgAAC(3)-II,分别在10s内使80μgGEN、30s内使80μgTOB和NTL乙酰化而失去抑菌作用。研究为氨基糖苷类抗生素伴侣的开发研究初步打下基础。
|
| 关 键 词： | 氨基糖苷乙酰转移酶 最低抑菌浓度 纯化 氨基糖苷类抗生素 |
Expression and Purification of AAC(3)-II,a Aminoglycoside Acetyltransferase,and Its Activity |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | AAC minimum inhibitory concentration purification aminoglycoside |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
