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银松素合酶基因地高辛标记RNA探针的合成
引用本文:郭晋隆,叶冰莹,黄庆煌,黄国强,许玉芬,林志楷,陈由强,陈如凯.银松素合酶基因地高辛标记RNA探针的合成[J].生物技术通讯,2006,17(6):891-894.
作者姓名:郭晋隆  叶冰莹  黄庆煌  黄国强  许玉芬  林志楷  陈由强  陈如凯
作者单位:1. 农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室,福建,福州,350002
2. 福建师范大学,生命科学学院,福建,福州,350007;发育与神经生物学福建省高等学校重点实验室,福建,福州,350007
3. 农业部甘蔗生理生态与遗传改良重点开放实验室,福建,福州,350002;福建师范大学,生命科学学院,福建,福州,350007;发育与神经生物学福建省高等学校重点实验室,福建,福州,350007
4. 福建师范大学,生命科学学院,福建,福州,350007
基金项目:国家自然科学基金项目(30371177),福建省科技厅项目(2005N037,K04030),国家部委项目(JA05225/wkj2)
摘    要:目的:体外转录合成银松素合酶(PS)基因地高辛标记反义RNA探针。方法:通过双酶切把PScDNA全长序列接到pBlueskriptⅡKS( )的多克隆位点上;同时,经由NCBI比对确定PScDNA的特异序列,设计含有SalⅠ和XbaⅠ这2个酶切位点的上、下游引物,用PCR法扩增含有该位点的目的片段,并连接到pBlueskriptⅡKS( )的多克隆位点上;最后利用pBlueskriptⅡKS( )上的启动子T7,用T7RNA聚合酶在体外转录合成地高辛标记PS全长及特异序列的反义RNA探针。结果:通过对构建探针的单、双酶切,PCR及电泳鉴定,表明成功合成了PS基因地高辛标记的全长及特异序列的反义RNA探针。结论:RNA探针的合成为后续马尾松PS基因表达的RNA原位杂交研究打下了基础。

关 键 词:银松素合酶基因  探针  马尾松  芪合酶
文章编号:1009-0002(2006)06-0891-04
收稿时间:03 15 2006 12:00AM
修稿时间:2006年3月15日

The Synthesis of DIG-Labelled Pinosylvin Synthase Gene RNA Probe
GUO Jin-long,YE Bing-ying,HUANG Qing-huang,HUANG Guo-qiang,XU YU-fen,LIN Zhi-kai,CHEN You-qiang,CHEN Ru-kai.The Synthesis of DIG-Labelled Pinosylvin Synthase Gene RNA Probe[J].Letters in Biotechnology,2006,17(6):891-894.
Authors:GUO Jin-long  YE Bing-ying  HUANG Qing-huang  HUANG Guo-qiang  XU YU-fen  LIN Zhi-kai  CHEN You-qiang  CHEN Ru-kai
Abstract:
Keywords:pinosylvin synthase gene  probe  Pinus massoniana Lamb  stilbene synthase
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