| 载体表达的siRNA分子对猪圆环病毒2型复制的抑制作用 |
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| 引用本文： | 王海燕,刘文博,高崧,刘秀梵. 载体表达的siRNA分子对猪圆环病毒2型复制的抑制作用[J]. 微生物学报, 2008, 48(11): 1507-1513 |
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| 作者姓名： | 王海燕 刘文博 高崧 刘秀梵 |
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| 作者单位： | 扬州大学农业部畜禽传染病学重点开放实验室,扬州,225009 |
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| 基金项目： | 高等学校博士学科点专项科研项目，江苏省农业三项工程项目 |
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| 摘 要： | [目的]寻找一种基于RNA干扰技术的猪圆环病毒2型感染的防控方法.[方法]根据猪圆环病毒2型毒株基因组核苷酸序列,设计了3条特异性小干扰RNA(short interfering RNA,siRNA)分子,其中2条针对猪圆环病毒1型和2型复制酶基因(rep),1条针对猪圆环病毒2型核衣壳蛋白基因(cap),将合成的DNA片段退火形成双链,分别连接到RNAi-Ready pSIREN-RetroQ ZsGreen载体鼠源U6启动子下游,转化大肠杆菌得到阳性克隆,测序鉴定后分别命名为Retro-SH1,Retro-SH4,Retro-SH6.用上述质粒转染PCV2感染前、后的Dulac细胞及肌肉注射PCV2感染前、后的BALB/c小鼠,应用实时定量PCR试验评价其对病毒在细胞及小鼠体内复制的抑制作用,免疫组化法检测脾脏中病毒的存在.[结果]感染PCV2前或后转染500 ng Retro-SH1,Retro-SH4,Retro-SH6质粒能有效抑制PCV2在Dulac细胞上的复制,抑制率最高可达99%以上,对10株不同来源的临床分离株在细胞中复制的抑制作用同样明显,且不同毒株间差异不大.动物试验中,肌肉注射10μg上述不同siRNA分子对小鼠体内PCV2的复制有一定的抑制作用,其抑制率在26%至99%之间.[结论]载体表达的siRNA分子可能成为防控猪圆环病毒2型感染的一种新工具.
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| 关 键 词： | RNA干扰 猪圆环病毒2型 复制 抑制 |
| 收稿时间： | 2008-04-24 |
| 修稿时间： | 2008-06-11 |
Inhibition of porcine circovirus type 2 replication by the plasmid vector ex-pressing siRNAs |
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| Haiyan Wang,Wenbo Liu,Song Gao and Xiufan Liu. Inhibition of porcine circovirus type 2 replication by the plasmid vector ex-pressing siRNAs[J]. Acta microbiologica Sinica, 2008, 48(11): 1507-1513 |
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| Authors: | Haiyan Wang Wenbo Liu Song Gao Xiufan Liu |
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| Affiliation: | Key Laboratory of Animal Infectious Diseases of Ministry of Agriculture, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Key Laboratory of Animal Infectious Diseases of Ministry of Agriculture, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Key Laboratory of Animal Infectious Diseases of Ministry of Agriculture, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China;Key Laboratory of Animal Infectious Diseases of Ministry of Agriculture, Yangzhou University, Yangzhou 225009, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keywords: RNA interference porcine circovirus type 2 replication inhibition |
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