| 一种新的螯虾丝氨酸蛋白酶抑制物基因的克隆表达及其活性分析 |
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| 引用本文： | 康桦华,陆承平.一种新的螯虾丝氨酸蛋白酶抑制物基因的克隆表达及其活性分析[J].动物学报,2005,51(6):1109-1114. |
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| 作者姓名： | 康桦华 陆承平 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(No.30170729)~~ |
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| 摘 要： | 根据本课题组从克氏原螯虾中新发现的丝氨酸蛋白酶抑制物的基因序列(GenBank登录号CD644775)设计一对引物,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,从螯虾血淋巴细胞中扩增出丝氨酸蛋白酶抑制物基因PCI188,将其连入原核表达载体pET-32a,转化至大肠杆菌Rosetta株和BL21株中进行蛋白表达,结果该蛋白只在前者表达。表达产物用免疫转印检测,出现50kD的特异性条带,与螯虾PCI188基因编码的蛋白大小相符。将融合蛋白纯化后免疫新西兰兔,用免疫血清与螯虾血淋巴作用后测定酚氧化酶活力,结果显示,酚氧化酶活力有所升高,从而首次证实螯虾PCI188编码的蛋白对丝氨酸蛋白酶有抑制作用。
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| 关 键 词： | 螯虾 丝氨酸蛋白酶抑制物 克隆 表达 免疫 酚氧化酶 |
| 收稿时间： | 2005-05-26 |
| 修稿时间： | 2005-05-262005-09-12 |
Cloning and expressing of a new serine proteinase inhibitor gene of crayfish and its activity analysis |
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| KANG Hua-Hua,LU Cheng-Ping.Cloning and expressing of a new serine proteinase inhibitor gene of crayfish and its activity analysis[J].Acta Zoologica Sinica,2005,51(6):1109-1114. |
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| Authors: | KANG Hua-Hua LU Cheng-Ping |
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| Institution: | Key Laboratory of Animal Disease Diagnostic and Immunology, Ministry of Agriculture, Nanjing Agricultural University, Nanjing 210095, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Crayfish Procambarus clarkii Serine proteinase inhibitor Cloning Expressing Inmmunization Phenoloxidase |
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