农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种转化体系的优化 |
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引用本文: | 高剑,肖苏生,王文华,曾涛,曾会才. 农杆菌介导的香蕉枯萎病菌4号生理小种转化体系的优化[J]. 基因组学与应用生物学, 2009, 28(6). DOI: 10.3969/gab.028.001197 |
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作者姓名: | 高剑 肖苏生 王文华 曾涛 曾会才 |
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作者单位: | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海口,571101 |
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基金项目: | 科技部国际科技合作项目,国家自然科学基金,中央级公益性科研院所中国热带农业科学院基本科研业务费专项资金资助项目,公益性行业(农业)科研专项经费项目任务书 |
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摘 要: | 香蕉枯萎病是世界范围内香蕉种植区最为严重的病害之一,严重威胁和影响着香蕉产业的发展.本文针对香蕉枯萎病病原菌的4号生理小种,建立了农杆菌介导的转化体系,确定了影响转化效率主要因子的优化体系是:农杆菌在IM培养基诱导前农杆菌OD_(600)为0.15、农杆菌经IM液体培养基诱导的时间为7 h、乙酰丁香酮(AS)浓度为150 μmol/L、Focr4孢子浓度为1×10~6个/mL、共培养时间为48 h、培养温度为25℃、诱导培养基pH值为5.5.在此条件下,转化效率能达到700~800个转化子/10~6个香蕉枯萎病菌孢子.PCR验证表明外源的T-DNA已经成功随机地整合到该病原菌基因组中.目前,应用该转化体系已获得2 300多个转化子,为后续克隆相关致病基因打下了良好基础.
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关 键 词: | 香蕉枯萎病 4号生理小种 T-DNA插入 优化体系 |
Optimization of Agrobacterium-mediated Transformation System of Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4 |
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Abstract: | |
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Keywords: | Banana wilt disease Fusarium oxysporum f.sp.cubense(FOC)race4 T-DNA insertion Optimized the transformation |
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